[发明专利]一种苯并呋喃-6-羧酸中苯并呋喃-5-羧酸的检测方法

说明书

本发明属于药物分析领域，具体涉及一种苯并呋喃‑6‑羧酸中苯并呋喃‑5‑羧酸的检测方法，它是采用高效液相色谱法检测。本发明通过特定的溶剂和色谱条件，可以将苯并呋喃‑6‑羧酸与苯并呋喃‑5‑羧酸在色谱图中有效分离，经方法学验证表明，本发明专属性，精密度良好，准确度高和灵敏度高，符合《中国药典》2020年版对分析方法学的要求，可有效监控利他司特关键起始物料苯并呋喃‑6‑羧酸的合成过程，用于苯并呋喃‑6‑羧酸的质量检测，保证其质量，进而保证药品利他司特的质量安全，应用前景广阔。

技术领域

本发明属于药物分析领域，具体涉及一种苯并呋喃-6-羧酸中苯并呋喃-5-羧酸的检测方法。

背景技术

利他司特(Lifitegrast)是由爱尔兰夏尔开发公司(Shire Dev Llc)研发，是新型的小分子整合素抑制剂，可结合整合素LFA-1(淋巴细胞功能相关抗原-1)，阻断LFA-1与同源配体ICAM-1(胞间粘附分子-1)的相互作用。干扰引起干眼病的角膜与结膜组织的ICAM-1过度表达。2015年4月9日向美国食品药品管理局(FDA)提出新药申请，并获得优先审查资格。在补充临床试验的有效性和安全性数据后，于2016年7月11日获得FDA批准上市，是首个治疗干眼症症状和体征的药物。

利他司特的化学名称为(S)-2-[2-(苯并呋喃-6-羰基)-5,7-二氯-1,2,3,4-四氢异喹啉-6-甲酰胺基]-3-(3-甲磺酰基苯基)丙酸，分子式为C₂₉H₂₄Cl₂N₂O₇S，结构式如下：

利他司特关键起始物料苯并呋喃-6-羧酸的化学结构式如下：

解析该利他司特关键起始物料苯并呋喃-6-羧酸的化学结构和其合成工艺发现：化学名称为苯并呋喃-5-羧酸的物质是利他司特关键起始物料的邻位取代杂质，工艺中很可能会产生该杂质，该杂质与苯并呋喃-6-羧酸极性相似，在后续工艺中会产生新的杂质，难以去除。开发该杂质的分析检测方法，并进行定性定量分析，可严格控制利他司特关键起始物料的质量品质，从而保证产品利他司特API的质量符合要求，但目前还没有关于苯并呋喃-6-羧酸中杂质苯并呋喃-5-羧酸的分析方法的报道。

发明内容

为了有效控制利他司特的质量品质，本发明提供了一种苯并呋喃-6-羧酸中杂质苯并呋喃-5-羧酸的检测方法，它是采用高效液相色谱法检测，具体步骤如下：

a、供试品溶液制备：取待测苯并呋喃-6-羧酸，加甲醇水溶液溶解，即得；

b、系统适用性溶液的制备：取苯并呋喃-5-羧酸对照品，加甲醇水溶液溶解，得苯并呋喃-5-羧酸溶液；取苯并呋喃-6-羧酸对照品，加苯并呋喃-5-羧酸溶液溶解，再加甲醇-水溶液混匀，即得；

c、分别吸取供试品溶液和系统适用性溶液注入色谱仪，色谱条件如下：

色谱柱：以辛基硅烷键合硅胶为填充剂；流动相：以0.05～0.15％的无机酸水溶液为流动相A，以甲醇-四氢呋喃溶液为流动相B；梯度洗脱程序为：

进一步地，步骤a)所述待测苯并呋喃-6-羧酸与甲醇水溶液的质量体积比为0.2～1.0mg：1ml。

更进一步地，所述甲醇水溶液中甲醇与水的体积比为(70～90)：(10～30)，优选80：20。

进一步地，步骤b)所述系统适用性溶液每1ml含苯并呋喃-5-羧酸1～10μg，苯并呋喃-6-羧酸0.2～1.0mg。