[发明专利]一种治疗肾虚的中药制剂的特征图谱的构建方法

权利要求书

1.一种治疗肾虚的中药制剂的特征图谱的构建方法，包括：

A)将首乌地黄丸原料采用溶剂提取，得到待测液；

B)取首乌地黄丸中至少一个化学成分的标准品，分别配置得到相应浓度的参照物，混合得到参照物对照品溶液；

C)采用高效液相色谱法，在相同的检测条件下分别获得步骤A)中所述待测液和步骤B)中所述参照物对照品溶液中化学成分的色谱图，将待测液色谱图和参照物对照品溶液的色谱图相对应，即得；

具体的色谱参数如下：

色谱柱为苯基柱；流动相A为甲醇：乙腈＝1:1.2，流动相B为0.4％甲酸溶液，梯度洗脱。

2.根据权利要求1所述的构建方法，其特征在于，所述梯度洗脱具体为：

0～15min，A相5％～17％，B相95％～83％；

15～35.5min，A相17％～22％，B相83～78％％；

35.5～45.2min，A相22％～27％，B相78％～73％；

45.2～55min，A相27％～35％,B相73％～65％；

55～60min，A相35％～5％,B相65％～95％。

3.根据权利要求1所述的构建方法，其特征在于，所述色谱柱为苯基柱，规格为5μm，Agilent ZORBAX SB-Phenyl 250*4.6mm；柱温30～35℃。

4.根据权利要求1所述的构建方法，其特征在于，所述流动相流速为1.2mL/min；检测波长为285nm；进样量为5～10μL。

5.根据权利要求1所述的构建方法，其特征在于，所述参照物对照品为采用大黄酚对照品、橄榄苦苷对照品、2,3,5,4'-四羟基二苯乙烯-β-D-葡萄糖苷对照品、二苯乙烯苷对照品、旱莲苷A对照品、木犀草素-7-O-葡萄糖苷对照品、蟛蜞菊内酯对照品作为特征图谱的检测参照物；

所述大黄酚对照品的质量浓度为50μg/mL；橄榄苦苷对照品64μg/mL、2,3,5,4'-四羟基二苯乙烯-β-D-葡萄糖苷对照品25μg/mL、二苯乙烯苷对照品85μg/mL、旱莲苷A对照品60μg/mL、木犀草素-7-O-葡萄糖苷60μg/mL、蟛蜞菊内酯30μg/mL。

6.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，采用匹配参照物进行峰指认的方式进行质量评价，以与S峰的相对保留时间及相对峰面积对主要成分进行精准定位，得到由13个特征峰构成的特征图谱，其中峰3为橄榄苦苷，峰5为蟛蜞菊内酯，峰7为大黄酚，峰8为2,3,5,4'-四羟基二苯乙烯-β-D-葡萄糖苷，峰10为二苯乙烯苷，峰11为木犀草素-7-O-葡萄糖苷；峰13为旱莲苷A。

7.根据权利要求6所述的方法，其特征在于，在所述标准特征图谱中，以橄榄苦苷为参照峰S1峰，计算各特征峰与S峰的相对保留时间，所述相对保留时间在规定值的±10％之内，所述规定值分别为：0.589-峰1、0.918-峰2、1.34-峰4；计算峰1与S1的相对峰面积，其相对峰面积应在规定范围内，规定范围为：0.49～3.65(峰1)；

以二苯乙烯苷相对应的峰为S2峰，特征峰5、6、7、8、9、11、12、13相对S2的相对保留时间，其规定值应在规定值的±10％之内，规定值为：-0.740-峰5、0.823-峰6、0.890-峰7、0.930-峰8、0.961-峰9、1.241-峰11、1.313-峰12、1.456-峰13；计算峰6与S2的相对峰面积，其相对峰面积应在规定范围内，规定范围为：0.10～2.88(峰6)。

8.根据权利要求1所述的构建方法，其特征在于，步骤A)所述提取具体为：采用溶剂闪式提取，放冷，过滤；残渣用溶剂浸泡，滤液合并，即得。

9.根据权利要求1所述的构建方法，其特征在于，步骤A)所述溶剂为50％乙醇；所述首乌地黄丸原料和溶剂的料液比为1:30；所述提取转速为5500rpm，提取时间为40s；所述浸泡时间为10min。

10.根据权利要求1所述的构建方法，其特征在于，所述参照物对照品的溶剂为甲醇。