[发明专利]一种能有效提高葡萄糖脱氢酶稳定性的固定化方法在审
| 申请号: | 202310355626.3 | 申请日: | 2023-04-06 |
| 公开(公告)号: | CN116334067A | 公开(公告)日: | 2023-06-27 |
| 发明(设计)人: | 柳鹏福;闫婉青;储消和;陈艳;郝芯蕊 | 申请(专利权)人: | 浙江工业大学 |
| 主分类号: | C12N11/14 | 分类号: | C12N11/14;C12N9/04 |
| 代理公司: | 杭州浙科专利事务所(普通合伙) 33213 | 代理人: | 周红芳 |
| 地址: | 310006 浙江省*** | 国省代码: | 浙江;33 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 一种 有效 提高 葡萄糖 脱氢酶 稳定性 固定 方法 | ||
1.一种能有效提高葡萄糖脱氢酶稳定性的固定化方法,其特征在于,所述固定化方法包括以下步骤:
1)将葡萄糖脱氢酶液与磷酸缓冲溶液混合,得到酶的磷酸溶液;
2)向步骤1)得到的溶液中加入无机金属盐溶液;
3)将步骤2)得到的混合溶液孵育后,收集沉淀;
4)将步骤3)得到的沉淀用磷酸缓冲溶液洗涤1-3次,离心后得到固定化葡萄糖脱氢酶。
2.根据权利要求1所述的固定化方法,其特征在于,所述步骤2)中的无机金属盐为可溶性镍盐或钙盐,优选为可溶性钙盐。
3.根据权利要求1所述的固定化方法,其特征在于,所述步骤1)中葡萄糖脱氢酶在磷酸缓冲溶液中的终浓度为0.01-0.25mg/mL,优选为0.05 mg/mL,磷酸缓冲溶液浓度为10-30mmol/L,优选为20 mmol/L,磷酸缓冲溶液pH范围为6.5-9.2,优选为8。
4.根据权利要求3所述的固定化方法,其特征在于,所述步骤3)中孵育温度为4-40℃,优选为25℃,孵育时间为3-18h,优选为3h。
5.根据权利要求3所述的固定化方法,其特征在于,所述步骤3)中收集沉淀的方法为固液分离方法,包括离心、过滤、沉降。
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