[发明专利]黑磷纳米药物BTZ@BPQDs@EM@anti-BCMA及其构建方法在审
申请号: | 202310307427.5 | 申请日: | 2023-03-27 |
公开(公告)号: | CN116585486A | 公开(公告)日: | 2023-08-15 |
发明(设计)人: | 赵岳涛;萧小鹃;刘静;马泽康 | 申请(专利权)人: | 中南大学 |
主分类号: | A61K47/69 | 分类号: | A61K47/69;A61K47/68;A61K41/00;A61K31/69;A61P35/00;B82Y5/00 |
代理公司: | 长沙睿翔专利代理事务所(普通合伙) 43237 | 代理人: | 周松华;孙建霞 |
地址: | 410083 湖南*** | 国省代码: | 湖南;43 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 黑磷 纳米 药物 btz bpqds em anti bcma 及其 构建 方法 | ||
1.黑磷纳米药物BTZ@BPQDs@EM@anti-BCMA的构建方法,其特征在于,具体步骤如下:
(1)先将BCMAmAb与Traut’s试剂充分混合,反应,除盐,得到anti-BCMA-HS;
(2)接着向DSPE-PEG-Mal溶液中加入anti-BCMA-HS,搅拌孵育,得到DSPE-PEG-anti-BCMA;
(3)然后将黑磷量子点BPQDs与BTZ溶液充分混合孵育,得到BTZ@BPQDs,再将其与利用红细胞制成的EM囊泡混合,得到BTZ@BPQDs@EM,简称BBE;
(4)最后将DSPE-PEG-anti-BCMA与BTZ@BPQDs@EM混合孵育,即得。
2.根据权利要求1所述的构建方法,其特征在于,步骤(1)的具体方法如下:先将BCMAmAb与Traut’s试剂分别利用PBS在25℃-30℃配制成0.1-0.5mg/mLBCMAmAb溶液、0.1-0.5mg/mLTraut’s试剂溶液,接着将BCMAmAb溶液、Traut’s试剂溶液、5×10-3MPBS-EDTA缓冲液按照体积比500:27.5:20充分混合,然后转移至垂直混合仪中反应4-8h,使用脱盐柱清洗除去多余的Traut’s试剂,即得。
3.根据权利要求1所述的构建方法,其特征在于,步骤(2)的具体方法为:先将DSPE-PEG-Mal利用PBS配制成DSPE-PEG-Mal溶液,接着向DSPE-PEG-Mal溶液中加入与DSPE-PEG-Mal等摩尔量的anti-BCMA-HS,充分混合,转移至垂直混合仪中,室温反应12~18h,利用超滤离心管除去多余的DSPE-PEG-Mal,PBS重悬即得。
4.根据权利要求1所述的构建方法,其特征在于,步骤(3)中,黑磷量子点是通过下述方法制备得到的:先将黑磷晶体利用NMP反复研磨,得到1mg/mL混悬液,接着将混悬液转移至离心管中,冰上超声得到分散液,一次离心取上清,再次离心取沉淀,NMP重悬,即得。
5.根据权利要求1所述的构建方法,其特征在于,步骤(3)中,BTZ@BPQDs的制备方法如下:先将BPQDs对应5mMBTZ溶液充分混合,室温孵育24h,透析除去未反应的原料,即得;其中,BPQDs与BTZ溶液的配比为50μg:2mg。
6.根据权利要求1所述的构建方法,其特征在于,步骤(3)中,EM囊泡是通过以下方法制备得到的:先将健康人外周血利用PBS稀释成稀释血样,接着将稀释血样滴加至人外周血淋巴分离液中,得到悬液,悬液离心得到红细胞沉淀,再向红细胞沉淀中加入1×PBS,离心清洗,加入0.25×PBS,充分混合,冰上裂解,4℃,12000rpm离心10min,小心吸弃上层,保留红色膜层,加入1×PBS重悬膜层,再次离心处理,直至上清液呈现无色,底部粉红色沉淀即为红细胞膜,超声处理,挤压,离心取上清,即得。
7.根据权利要求1所述的构建方法,其特征在于,步骤(3)的具体方法如下:先将30μg/mLBTZ@BPQDs溶液与等质量EM囊泡混合,水浴超声处理,挤压处理,即得。
8.根据权利要求1所述的构建方法,其特征在于,步骤(4)的具体方法为:将0.2mg/mLDSPE-PEG-anti-BCMA与30μg/mLBTZ@BPQDs@EM等体积混合,37℃孵育1h,离心除去未结合的原料,即得。
9.利用权利要求1~8中任一项所述方法构建得到的黑磷纳米药物BTZ@BPQDs@EM@anti-BCMA。
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