[发明专利]负载荧光染料的仿生性纳米颗粒及其制备方法

权利要求书

1.负载荧光染料的仿生性纳米颗粒，其特征在于，包括：普朗尼克F127、荧光染料和巨噬细胞膜囊泡；所述颗粒带有负电荷、粒径小于100nm。

2.根据权利要求1所述的负载荧光染料的仿生性纳米颗粒，其特征在于：所述颗粒是由普朗尼克F127与荧光染料制备纳米胶束，再与巨噬细胞膜囊泡共挤出制备的；所述的荧光染料为吲哚菁绿或DiR-BOA。

3.根据权利要求2所述的负载荧光染料的仿生性纳米颗粒，其特征在于：所述的荧光染料为吲哚菁绿，所述吲哚菁绿的包封率为60～70％。

4.根据权利要求3所述的负载荧光染料的仿生性纳米颗粒，其特征在于：所述的纳米颗粒用于靶向淋巴结或/和靶向巨噬细胞。

5.根据权利要求4所述的负载荧光染料的仿生性纳米颗粒，其特征在于：所述普朗尼克F127、吲哚菁绿和巨噬细胞膜囊泡的质量比为5000-10000：1：25-100。

6.负载荧光染料的仿生性纳米颗粒的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：

S1、制备纳米胶束：将普朗尼克F127溶于氯仿，加入吲哚菁绿或DiR-BOA，氮吹至形成一层药膜；将药膜真空干燥，加去离子水，在45～55℃下搅拌25～35min，用0.22μm滤膜过滤，得到负载荧光染料的纳米胶束；

S2、制备巨噬细胞膜囊泡，重悬；

S3、添加步骤S1制备的纳米胶束与步骤S2制备的巨噬细胞膜囊泡，混匀，反复多次机械挤出，得到负载荧光染料的仿生性纳米颗粒；所述纳米胶束与巨噬细胞膜囊泡的质量比为100：0.5-1。

7.根据权利要求6所述的负载荧光染料的仿生性纳米颗粒的制备方法，其特征在于：所述的反复多次机械挤出，是连续通过400nm、200nm、100nm的聚碳酸酯多孔膜、反复挤压20～30次。

8.根据权利要求7所述的负载荧光染料的仿生性纳米颗粒的制备方法，其特征在于：所述步骤S2的巨噬细胞膜囊泡的制备，是通过培养、收集并清洗巨噬细胞，加入细胞裂解缓冲液重悬细胞，匀浆，在0～4℃下以15000～22000g离心20～30min，取上清，再在0～4℃下100000～150000g超高速离心55～65min，弃上清，得到沉淀即为巨噬细胞膜囊泡。

9.根据权利要求8所述的负载荧光染料的仿生性纳米颗粒的制备方法，其特征在于：所述细胞裂解缓冲液包括225mMd-甘露醇、30mM Tris-HCl、75mM蔗糖、0.2mMEGTA，pH＝7.5。

10.根据权利要求9所述的负载荧光染料的仿生性纳米颗粒的制备方法，其特征在于：所述超高速离心的转速为120000g、时间为60min。

11.权利要求1-5任意一项所述的负载荧光染料的仿生性纳米颗粒在制备检测前哨淋巴结的药物方面的应用。