[发明专利]一种脂肪间充质干细胞外泌体及制备方法、应用

权利要求书

1.一种脂肪间充质干细胞外泌体，其特征为：所述的脂肪间充质干细胞外泌体通过当归饮子提取液或者含有当归饮子提取液成分的血清对人脂肪间充质干细胞预处理制成。

2.如权利要求1所述的一种脂肪间充质干细胞外泌体的制备方法，其特征为，包括如下步骤：

步骤1、取人脂肪间充质干细胞，通过归饮子提取液或者含有当归饮子提取液成分的血清预处理；

步骤2、通过超速离心法提取外泌体。

3.如权利要求2所述一种脂肪间充质干细胞外泌体的制备方法，其特征为，所述的步骤1包括如下具体步骤：

(11)取人脂肪间充质干细胞，待细胞融合度达到70～80％时，将人脂肪间充质干细胞的完全培养基更换为含10％无外泌体胎牛血清；

(12)给予不同浓度无菌当归饮子提取液或含有当归饮子提取液成分的血清，正常培养48小时后，收集上清样本，采用CCK8法检测细胞活性。

4.如权利要求3所述一种脂肪间充质干细胞外泌体的制备方法，其特征为，所述的具体步骤(11)中，人脂肪间充质干细胞的型号为CP-H202。

5.如权利要求3所述一种脂肪间充质干细胞外泌体的制备方法，其特征为，所述的具体步骤(12)中，当归饮子提取液的浓度为10μg/ml或100μg/ml。

6.如权利要求3所述一种脂肪间充质干细胞外泌体的制备方法，其特征为，所述的具体步骤(12)中，含有当归饮子提取液成分的血清的制备方法为：人或实验动物服用当归饮子提取液一定时间后，对人或实验动物的血清进行提取。

7.如权利要求2所述一种脂肪间充质干细胞外泌体的制备方法，其特征为，所述的步骤2包括如下具体步骤：

(21)将上清样本移动至离心管内，以转速2000×g，设定温度4℃，设定时间30min的条件进行超速离心；离心后，将离心管内的上清液移至新的离心管中，以转速10000×g，设定温度4℃，设定时间45min的条件超速离心，离心后，以去除较大的囊泡，取上清液，经0.45μm滤膜过滤，收集过滤液；

(22)将过滤液移至新的离心管中，选择超速转子，设定温度4℃，转速100000×g，离心70min；去除上清，用10mL预冷的1×PBS重悬后，选择超速转子，再次以温度4℃，转速100000×g，超速离心70min；去除上清，用100μL预冷的1×PBS重悬；脂肪间充质干细胞外泌体制备成功。

8.如权利要求1所述的一种脂肪间充质干细胞外泌体的应用，其特征为：所述的脂肪间充质干细胞外泌体应用于特应性皮炎的治疗。