[发明专利]一种非均质组织中病灶深度定位方法

权利要求书

1.一种非均质组织中病灶深度定位方法，其特征在于，包括以下步骤：

步骤1、制备表面增强拉曼散射探针纳米颗粒；

步骤2、制备表面增强拉曼散射探针造影剂，将所述表面增强拉曼散射探针造影剂超声分散；测量并记录所述表面增强拉曼散射探针造影剂的拉曼光谱；

步骤3、将待测生物样品放置于载物台上，并将所述表面增强拉曼散射探针造影剂注入所述生物样品中，进行拉曼检测；

步骤4、对检测得到的拉曼光谱进行分析，构建超定方程组并求解，算出各种均质组织的各自厚度，相加获得病灶深度。

2.如权利要求1所述的非均质组织中病灶深度定位方法，其特征在于，所述表面增强拉曼散射探针纳米颗粒包覆介孔二氧化硅层。

3.如权利要求2所述的非均质组织中病灶深度定位方法，其特征在于，所述步骤1包括：制备得到含有拉曼信号分子的核壳结构的表面增强拉曼探针5mL0.6nmol/L，离心、重分散在5mL0.004mol/L十六烷基氯化铵溶液中，加入0.1mol/L的NaOH溶液将溶液的pH值调至10-11；将溶液温度保持为30℃，然后分三次加入含有5％正硅酸四乙酯的甲醇溶液，每次70μL，每次时间间隔30分钟，继续搅拌反应17h，获得包覆15nm介孔二氧化硅层的纳米颗粒；离心洗涤，均匀分散于无水乙醇中，从而获得表面增强拉曼探针纳米颗粒。

4.如权利要求3所述的非均质组织中病灶深度定位方法，其特征在于，所述步骤2包括：将所述表面增强拉曼探针纳米颗粒均匀分散于生理盐水中制成0.6nmol/L的表面增强拉曼探针造影剂；测量纯表面增强拉曼探针造影剂的拉曼光谱；将颗粒超声分散并取30-200μL注入非均质组织样品中。

5.如权利要求4所述的非均质组织中病灶深度定位方法，其特征在于，所述步骤3包括：使用785nm激光波长的扩散光束，光斑为直径0.5-1.7cm的圆形，功率密度为0.2-1.01W/cm²的激光自下而上照射在非均质组织样品的下表面。

6.如权利要求5所述的非均质组织中病灶深度定位方法，其特征在于，所述步骤3还包括：使用拉曼光纤探头在所述非均质组织样品的上表面检测特征拉曼信号。

7.如权利要求6所述的非均质组织中病灶深度定位方法，其特征在于，所述步骤4通过选择特征拉曼信号中的多个谱峰对，构建超定方程组。

8.如权利要求7所述的非均质组织中病灶深度定位方法，其特征在于，所述超定方程组如下：

其中，I₁，I₂，I₃，I₄代表不同的拉曼峰，X₁，X₂，…，X_n代表拉曼光子到达收集面和检测探头前传播过的各种类型组织的厚度；Δμ为各个谱峰对在不同组织内的衰减系数。

9.如权利要求8所述的非均质组织中病灶深度定位方法，其特征在于，所述步骤4还包括：预先根据已有报道的吸收系数μ_a和有效散射系数μ_s'来推算或相关的测试方法获得Δμ。

10.如权利要求9所述的非均质组织中病灶深度定位方法，其特征在于，所述步骤4中计算病灶深度的公式为：d＝X₁+X₂+…X_n。