[发明专利]一种一锅酶法制备L-5-MTHF的方法在审
| 申请号： | 202310144165.5 | 申请日： | 2023-02-21 |
| 公开（公告）号： | CN116574768A | 公开（公告）日： | 2023-08-11 |
| 发明（设计）人： | 陈小龙;朱林江;陆跃乐;王佳燕;朱勇刚;周斌 | 申请（专利权）人： | 浙江圣达生物药业股份有限公司;浙江工业大学;浙江渚隆生物科技有限公司 |
| 主分类号： | C12P17/18 | 分类号： | C12P17/18 |
| 代理公司： | 浙江千克知识产权代理有限公司 33246 | 代理人： | 冷红梅 |
| 地址： | 317200 浙江省台*** | 国省代码： | 浙江;33 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 一锅 法制 mthf 方法 | ||
1.一种一锅酶法制备L-5-MTHF的方法，其特征在于：包括以下步骤：
往叶酸中加入二氢叶酸还原酶、四氢叶酸甲基转移酶，催化反应，得到L-5-MTHF。
2.如权利要求1所述的一种一锅酶法制备L-5-MTHF的方法，其特征在于：所述二氢叶酸还原酶的氨基酸序列与SEQ ID NO.2所示序列具有80％的同源性。
3.如权利要求1所述的一种一锅酶法制备L-5-MTHF的方法，其特征在于：所述二氢叶酸还原酶的氨基酸序列与SEQ ID NO.4所示序列具有80％的同源性。
4.如权利要求1所述的一种一锅酶法制备L-5-MTHF的方法，其特征在于：所述二氢叶酸还原酶的氨基酸序列与SEQ ID NO.6所示序列具有80％的同源性。
5.如权利要求1所述的一种一锅酶法制备L-5-MTHF的方法，其特征在于：所述二氢叶酸还原酶的氨基酸序列与SEQ ID NO.8所示序列具有80％的同源性。
6.如权利要求1所述的一种一锅酶法制备L-5-MTHF的方法，其特征在于：所述四氢叶酸甲基转移酶的氨基酸序列与SEQ ID NO.10所示序列具有80％的同源性。
7.如权利要求1所述的一种一锅酶法制备L-5-MTHF的方法，其特征在于：所述催化反应加入甲基供体、NAD(P)依赖的脱氢酶及辅酶底物中的一种或多种。
8.如权利要求7所述的一种一锅酶法制备L-5-MTHF的方法，其特征在于：所述甲基供体为二甲基巯基丙酸。
9.如权利要求7所述的一种一锅酶法制备L-5-MTHF的方法，其特征在于：脱氢酶选自醇脱氢酶、葡萄糖脱氢酶与甲酸脱氢酶，所述辅酶底物选自异丙醇、葡萄糖与甲酸。
10.如权利要求1所述的一种一锅酶法制备L-5-MTHF的方法，其特征在于：所述催化反应的温度为25～40℃，所述催化反应的pH为7.0～9.0。
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