[发明专利]一种溶菌酶包合颗粒的制备方法及其产品

说明书

本发明提供一种溶菌酶包合颗粒的制备方法及其产品，属于固定化酶制备技术领域。本发明所述制备方法包括如下步骤：称取真空干燥后的AB‑8大孔树脂与磷酸盐缓冲液混合，150～200r/min混匀20～40min，待完全溶解后加入溶菌酶，150～200r/min混匀20～40min，加入终质量浓度为0.4～0.8g/100mL的戊二醛溶液混匀，固定化4.3～4.8h，过滤洗涤，即得溶菌酶包合颗粒。本发明制备的溶菌酶包合颗粒使用4～6次后，酶活仍保留80～95％，在45～52℃温度下仍可保持最高活性，其活性重复利用度和稳定性明显高于游离溶菌酶。

技术领域

本发明属于固定化酶制备技术领域，具体涉及一种溶菌酶包合颗粒的制备方法及其产品。

背景技术

溶菌酶(Lysozyme，EC 3.2.1.17)因其具有溶菌作用，即能够使细菌细胞壁上N-乙酰葡萄糖胺和N-乙酰胞壁酸连接的(β-1，4糖苷键)准确断裂，从而达到细胞裂解的目的，故被称溶菌酶。溶菌酶在食品工业中的应用，如在防腐保鲜、保健食品添加剂、婴儿食品添加剂等；在医学上的应用，如抑制口腔疾病、葡萄球菌的感染等；在畜牧业的应用，如制作饲料添加剂以达到在牲畜体内抗菌、抗病毒、提高免疫的效果等。

在饲料食品工业中，溶菌酶能够选择性的杀灭牲畜肠道中的有害菌，例如大肠杆菌等，可以安全替代对动物有害的化学添加剂，以达到很好的抗菌治疗效果，是一种优良的无毒副作用的饲料添加剂，然而，由于游离酶在发挥功能过程中易受到温度、pH、强酸、强碱、存储等环境的影响，导致活性降低和不稳定。因此提高溶菌酶活性和稳定性是人类需要解决的技术问题。

发明内容

本发明提供了一种溶菌酶包合颗粒的制备方法及其产品，经该方法制备的溶菌酶包合颗粒活性重复利用度和稳定性明显高于游离溶菌酶。

为解决上述技术问题，本发明提供了以下技术方案：

本发明提供一种溶菌酶包合颗粒的制备方法，包括如下步骤：称取真空干燥后的AB-8大孔树脂与磷酸盐缓冲溶液混合，150～200r/min混匀20～40min，待完全溶解后缓慢加入溶菌酶，150～200r/min混匀20～40min，加入终浓度为0.4～0.8g/100mL的戊二醛溶液混匀，固定化4.3～4.8h，过滤洗涤，即得溶菌酶包合颗粒。

优选的，所述溶菌酶与AB-8大孔树脂的加入质量比为1：150～250。

优选的，所述溶菌酶的浓度为0.5～2.5mg/mL

优选的，所述固定化温度为20～30℃。

本发明提供所述制备方法制备的溶菌酶包合颗粒。

优选的，所述溶菌酶包合颗粒可耐受温度为45～52℃，所述溶菌酶包合颗粒使用4～6次后，酶活仍保留80～95％。

本发明提供所述溶菌酶包合颗粒在制备饲料中的应用。

与现有技术相比，本发明具有如下有益效果：

(1)本发明以大孔树脂AB-8为载体，在分子间的范德华力、氢键等作用力下对酶进行吸附，以戊二醛作为交联剂，使溶菌酶非活性分子交联，提高了载体对酶的吸附稳定性；本发明在制备过程中设定了两次低转速下混合，有利于溶菌酶与大孔树脂有效结合，更有效包埋溶菌酶；本发明在制备过程中设定合适的原料用量、固化时间、固化温度，进一步提高了溶菌酶的可重复利用性和稳定性。

(2)本发明制备的溶菌酶包合颗粒使用4～6次后，酶活仍保留80～95％，在45～52℃温度下仍可保持最高活性，较未包合游离酶提高5℃耐受能力，其活性重复利用度和稳定性明显高于游离溶菌酶。

(3)本发明制备方法简便易行，对操作人员无要求，过程中不产生异味、营养成分的损失、无需其他加热等能源消耗。

附图说明