[发明专利]一种原代上皮细胞的培养体系和应用

权利要求书

1.一种原代上皮细胞的培养体系，其特征在于，按重量百分比计，所述培养体系包括：基础培养基81.5-97.5％、胎牛血清小于2％且不小于0.5％、抗生素1-5％和添加剂0.5-2％，所述添加剂包括多种生长因子。

2.根据权利要求1所述的原代上皮细胞的培养体系，其特征在于，所述基础培养基包括氨基酸、维生素、盐类、脂类、微量元素、嘌呤、嘧啶、缓冲液和pH指示剂。

3.根据权利要求1所述的原代上皮细胞的培养体系，其特征在于，所述添加剂为在4℃保存时容易分解的物质，所述添加剂以工作浓度100倍的浓度配置成溶液在-20℃长期保存，使用时按百分之一的量添加至所述基础培养基中。

4.根据权利要求1所述的原代上皮细胞的培养体系，其特征在于，所述多种生长因子包括重组人表皮细胞生长因子、重组人胰岛素、人全铁转铁蛋白、三碘甲状腺氨酸和牛脑垂体提取物。

5.根据权利要求4所述的原代上皮细胞的培养体系，其特征在于，所述添加剂还包括腺嘌呤和氢化可的松。

6.根据权利要求5所述的原代上皮细胞的培养体系，其特征在于，所述添加剂中各组分在培养体系中的浓度为：重组人表皮细胞生长因子15-25ng/ml、氢化可的松300-600ng/ml、三碘甲状腺氨酸4-8pg/ml、腺嘌呤18-25ug/ml、重组人胰岛素5-10ug/ml、人全铁转铁蛋白5-10ug/ml、牛脑垂体提取物浓度为0.25-0.4％。

7.根据权利要求1所述的原代上皮细胞的培养体系，其特征在于，所述抗生素包括青霉素和链霉素。

8.根据权利要求7所述的原代上皮细胞的培养体系，其特征在于，青霉素和链霉素以工作浓度100倍的浓度配置成溶液在-20℃长期保存，使用时按百分之一的量添加至所述基础培养基中。

9.一种权利要求1-8任一项所述的培养体系在培养上皮细胞中的应用。

10.一种权利要求1-8任一项所述的培养体系在肠上皮屏障功能实验中的应用。