[发明专利]一种hURAT1抑制剂的筛选方法、筛选的化合物及其应用

说明书

本发明公开了一种hURAT1抑制剂的筛选方法、筛选的化合物及其应用。通过计算机辅助药物设计构建hURAT1抑制剂筛选模型，选定药效团和筛选化合物库，并通过细胞生物学试验筛选，获得hURAT1抑制剂的候选化合物。本发明筛选方法共从703个化合物中筛选出10个候选化合物，其中7项为已知化合物，3个未知化合物，为NP023335、TN1148和TN1008，所获得的化合物能够有效抑制肾脏重吸收尿酸，并具有高溶解度、低心脏毒性、良好的膜通透性和口服吸收的特点，为寻找治疗高尿酸血症的药物提供新的思路。

技术领域

本发明属于抑制高尿酸血症药物技术领域，特别涉及人尿酸转运蛋白1(hURAT1)抑制剂的筛选方法及其应用。

背景技术

高尿酸血症是痛风的早期症状，近年来其患病率呈上升趋势，且患者年龄呈年轻化趋势。根据临床研究，90％以上的高尿酸血症是由于尿酸排泄不足引起的，剩下的10％是由于尿酸分泌过多引起的。大多数高尿酸血症和痛风患者存在肾尿酸排泄功能障碍，而健康人可以保持尿酸生成和排泄的动态平衡。

高尿酸血症患者的临床症状为血清尿酸水平高，而血清尿酸(SUA)水平主要受肾脏排泄和再吸收机制的影响。控制肾脏重吸收尿酸的主要转运蛋白是尿酸转运蛋白1(hURAT1，约90％)，其次是葡萄糖转运蛋白9(GLUT9，约10％)。抑制hURAT1可减少尿酸在肾小管的重吸收，促进尿酸排泄。因此，靶向hURAT1被认为是一种很有前途的尿酸排泄策略。

目前促进尿酸排泄的药物有苯溴马隆、雷西纳德(Resinurad)等，苯溴马隆是降尿酸药物中疗效最好的，但它具有严重的肝毒性，雷西纳德是一种口服降尿酸药物，存在疗效低、治疗窗口窄的缺点，正在临床开发的药物维立诺雷(Verinurad)，是雷西纳德的类似物，用于高尿酸治疗的hURAT1抑制剂存在毒副作用或活性差的缺点，长期难以在临床实践中使用，因此获得低毒、高抑制作用的先导化合物至关重要。

发明内容

本发明提供了一种hURAT1抑制剂的筛选方法、筛选化合物及其应用。目的是建立一种hURAT1抑制剂的筛选方法，筛选具有促进尿酸排泄药物具有毒副作用、疗效低及活性差的化合物。

为实现上述发明目的，本发明采用以下技术方案予以实现：

本发明的第一方面，提供了一种hURAT1抑制剂的筛选方法，其特征在于，具体的筛选步骤如下：

1)基于Alphafold2软件构建的hURAT1蛋白质三维结构；

2)确定结合位点：采用SiteMap分析法，确定hURAT1中与尿酸摄取相关的结合口袋；

3)化合物库的选择；

4)分子对接，采用Watvina对化合物库进行筛选，采用IFD和MM/GBSA对化合物进行二次筛选；

5)化合物抑制活性评价。

进一步的，所述筛选方法中采用的筛选化合物库为T2220数据库。

进一步的，所述筛选方法中，构建的药效团模型为3个药效团，如下：

第一药效团特征为阴离子位点，所述的阴离子通过氢键或离子相互作用与蛋白质结合袋中的残基相互作用；

第二药效团特征为刚性骨架结构，具有至少一个能够形成芳香氢键或π-π叠加相互作用的芳香环或芳香杂环结构；

第三药效团特征为阴离子位点附近较大的位阻基团。

进一步的，所述第一药效团的阴离子基是羧酸根或酚羟基，优选的，所述第一药效团的阴离子基是为羧酸根或者邻位酚羟基；

进一步的，所述的第三药效团位阻基团为疏水性原子。