[发明专利]一种适用于微囊藻培养的培养液、制备方法和培养方法

说明书

本申请涉及一种适用于微囊藻培养的培养液、制备方法和培养方法。一种适用于微囊藻培养的培养液，所述培养液由营养工作液和维生素液组成，所述营养工作液以50000重量份计，包括如下组分：硝酸钠40‑50份、磷酸二氢钾1‑3份、碳酸钠2‑5份、硫酸镁1‑3份、硫酸亚铁2‑5份、L‑精氨酸6‑10份、硼酸0.1‑0.5份、硫酸锌0.05‑0.2份、硫酸铜0.01‑0.1份以及乙二胺四乙酸二钠0.01‑0.1份，余量为水。本申请通过调整培养液的组分以及用量，可以降低体系中离子的相互反应，降低培养液中沉淀的产生；并且本申请的培养液更适合于微囊藻的培养，对其次级代谢产物的产生以及积累具有促进作用。

技术领域

本申请涉及微生物培养技术领域，更具体地说，它涉及一种适用于微囊藻培养的培养液、制备方法和培养方法。

背景技术

铜绿微囊藻(Microcysis aeruginosa)隶属于蓝藻门、球藻目、微囊藻属，是一种全球广泛分布的淡水蓝藻，其易在富营养化的湖泊、溪流中形成“水华”，对生态环境具有较强的破坏能力。铜绿微囊藻可产生微囊藻毒素(Microcystin，MC)，该毒素是一种肝毒素，不仅破坏生态环境，还可通过食物链传播危害人类健康。目前微囊藻毒素多用于食品或环境质量的检测、监控。

在铜绿微囊藻培养的过程中，普遍使用BG11培养液，常规的BG11培养基的组分一般包括：NaNO₃、MgSO₄、K₂HPO₄、CaCl₂·2H₂O、Na₂CO₃、柠檬酸、柠檬酸铁铵、EDTA钠盐、H₃BO₃、MnCl₂·4H₂O、Na₂MoO₄·2H₂O、ZnSO₄·7H₂O、CuSO₄·5H₂O、Co(NO₃)₂·6H₂O等。这种BG11培养液由大量元素、微量元素以及维生素等组成，其具有很好的普适性，但针对性不足。

此外，目前的BG11培养基在使用时经过高温灭菌处理后，很容易产生沉淀，其原因比较复杂，一般认为是由于钙离子、铁离子、铜离子等成分的存在，易与硫酸根、碳酸根等反应，从而形成沉淀；而沉淀的产生意味着原溶解状态的营养成分变成了固态，即原有培养基成分被破坏，一方面不利于培养液的保存和某一营养盐的定量研究，另一方面也不利于铜绿微囊藻次级代谢产物的产生和积累。

基于此，需要一种适用于微囊藻培养且不易产生沉淀、便于储存的培养液。

发明内容

为了解决上述技术问题，本申请提供一种适用于微囊藻培养的培养液、制备方法和培养方法。

第一方面，本申请提供一种适用于微囊藻培养的培养液，采用如下的技术方案：

一种适用于微囊藻培养的培养液，包括所述培养液由营养工作液和维生素液组成，所述营养工作液以50000重量份计，包括如下组分：硝酸钠40-50份、磷酸二氢钾1-3份、碳酸钠2-5份、硫酸镁1-3份、硫酸亚铁2-5份、L-精氨酸6-10份、硼酸0.1-0.5份、硫酸锌0.05-0.2份、硫酸铜0.01-0.1份以及乙二胺四乙酸二钠0.01-0.1份，余量为水。

通过采用上述技术方案，通过调整培养液的组分及用量，可以降低体系中离子的相互反应，降低培养液中沉淀的产生；并且相较于常规的BG11培养基，本申请的培养液通过氮元素、铁元素、精氨酸等组分及含量的调整，使其更适合于微囊藻的培养，对其次级代谢产物的产生以及积累具有促进作用。

可选的，所述维生素液以500重量份计，包括如下组分：维生素B10.01-0.05份、维生素B2 0.001-0.005份以及维生素B12 0.001-0.005份，余量为水。