[发明专利]一种甲氨蝶呤纳米载药体系及其制备方法与治疗类风湿性关节炎的应用

说明书

本发明公开了一种甲氨蝶呤纳米载药体系及其制备方法与治疗类风湿性关节炎的应用，具体为一种甘露糖修饰的还原响应性囊泡包载甲氨蝶呤用于类风湿性关节炎的治疗技术方案。本发明公开的甲氨蝶呤纳米载药体系递送到巨噬细胞，纳米药物进入炎症部位巨噬细胞内，发挥药物作用，将M1M转化为M2M；在RA小鼠模型中，Man‑PMTX能够靶向到达并停留在炎症关节内，将体内M1促炎型巨噬细胞转化为M2抑炎型巨噬细胞，并降低了促炎型细胞因子释放同时促进抑炎型细胞因子的释放，适当调节炎症关节内的炎症微环境，快速减缓RA进展。Man‑PMTX治疗结果显示其在RA关节中可以有效积累，快速缓解炎症，同时具有较低的副作用，这表明其是一种简便而有效的RA治疗方法。

技术领域

本发明涉及纳米药物，具体涉及一种甘露糖修饰的还原响应性囊泡包载甲氨蝶呤用于类风湿性关节炎的治疗技术方案。

背景技术

类风湿性关节炎（RA）是一种系统性自身免疫疾病，临床的一些抗风湿性关节炎药物可以控制由RA引起的炎症和疼痛，但不能有效的阻止骨破坏的形成与发展，这些造成了RA患者的关节疼痛、关节部位严重肿胀、关节畸形甚至永久性不可逆损伤。部分RA药物已经被批准用于临床，其中甲氨蝶呤（MTX）在低剂量治疗时可以实现对RA的整体抗炎效果，其具体治疗机制目前尚未完全研究清楚。MTX作为一种亲水性的小分子药物，其具有一些药物治疗缺陷，如：循环时间短，生物利用率低，起效慢，需要长期持续治疗，容易发生不良反应和造成骨侵蚀。针对MTX的治疗缺点，现有技术出现了许多包载MTX的纳米药物，其可以通过主动靶向和被动靶向作用递送到患病部位进行抗风湿性治疗，比如一种基于人血清白蛋白的装载有MTX的纳米药物（MTX@HSA NMs）用于SPARC靶向RA治疗。现有技术公开的MTX纳米药物制备方法还需简化，治疗效果还需提升。

发明内容

现有包载MTX的脂质体、纳米颗粒等药物实现了通过被动运输的方式进入炎症部位，但是这些纳米体系的治疗效果还需改善。本发明公开了新的甘露糖修饰的还原响应性囊泡包载甲氨蝶呤，Man-PMTX对RA小鼠腿部炎症的消除效果、对病变关节处滑膜的炎症浸润减缓、软骨的骨保护作用以及关节处免疫微环境的调控具有优异的作用效果。

本发明采用如下技术方案：

一种甲氨蝶呤纳米载药体系，包括聚合物囊泡以及甲氨蝶呤；聚合物包括PEG-P(TMC-DTC)-Y、PEG-P(CL-DTC) -Y或者PEG-P(LA-DTC) –Y，Y为阳离子片段；进一步的，聚合物还包括X-PEG-P(TMC-DTC)、X-PEG-P(CL-DTC)或者X-PEG-P(LA-DTC)，X为修饰分子；优选的，X为甘露糖。

本发明以含双硫五元环的DTC单体、其他单体（TMC、CL、LA）与聚乙二醇共聚制备嵌段聚合物，结合阳离子片段或者修饰分子，得到用于包载甲氨蝶呤的聚合物，聚合物的分子量为10～50 kg/mol，聚合物中，PEG链段的分子量为2～10 kg/mol，阳离子片段的分子量为0.1～2 kg/mol，DTC链段的分子量为1～5 kg/mol。优选的，聚合物的分子量为20～35 kg/mol，聚合物中，DTC链段的分子量为1.5～4 kg/mol。

本发明公开了上述甲氨蝶呤纳米载药体系的制备方法，以聚合物、甲氨蝶呤为原料，制备甲氨蝶呤纳米载药体系；其中，所述聚合物为含阳离子片段聚合物，包括PEG-P(TMC-DTC)-Y、PEG-P(CL-DTC) -Y或者PEG-P(LA-DTC) –Y；或者聚合物为含阳离子片段聚合物和含修饰分子聚合物（包括X-PEG-P(TMC-DTC)、X-PEG-P(CL-DTC)或者X-PEG-P(LA-DTC)），其中含阳离子片段聚合物、含修饰分子聚合物的摩尔比为1∶（0～0.5），不包括0。具体的，利用静电相互作用将甲氨蝶呤装载入聚合物囊泡，得到甲氨蝶呤纳米载药体系。

本发明还公开了一种甲氨蝶呤纳米载药体系冻干粉，将上述甲氨蝶呤纳米载药体系与冻干保护剂混合后冷冻干燥，得到甲氨蝶呤纳米载药体系冻干粉；具体冻干方法为现有技术。