[发明专利]一种核定位人源α突触核蛋白转基因小鼠的构建方法有效
| 申请号： | 202310029606.7 | 申请日： | 2023-01-09 |
| 公开（公告）号： | CN115896178B | 公开（公告）日： | 2023-08-25 |
| 发明（设计）人： | 吴正存;马开利;唐东红;黄璋琼;李哲丽;龙维虎;杜廷福;胡鹏;韦梦晨 | 申请（专利权）人： | 中国医学科学院医学生物学研究所 |
| 主分类号： | C12N15/867 | 分类号： | C12N15/867;C12N5/10;C12N15/89;C12N15/877;A01K67/027 |
| 代理公司： | 昆明人从众知识产权代理有限公司 53204 | 代理人： | 沈艳尼 |
| 地址： | 650118 *** | 国省代码： | 云南;53 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 核定 位人源 突触 核蛋白 转基因 小鼠 构建 方法 | ||
【权利要求书】：
1.一种核定位人源α突触核蛋白转基因小鼠的构建方法，其特征在于，步骤如下：
(1)以过表达人源α突触核蛋白质粒为模板，采用下述引物，通过PCR方法获取核定位人源α突触核蛋白序列：
上游引物：TTGCGGCCGCACCGCCATGGATGTA；
下游引物：TCCCCCGGGTTATACCTTTCTCTTCTTTTTTGGGGCTTCAGGTTCG；
(2)在慢病毒过表达载体中插入核定位人源α突触核蛋白序列，获得过表达核定位α突触核蛋白的慢病毒载体；
(3)采用293FT细胞株，配合辅助质粒psPAX2和PMD.2G，进行过表达核定位α突触核蛋白的慢病毒的包装，验证无误的病毒进行浓缩纯化和病毒滴度测定；
(4)采用显微注射方法将过表达核定位α突触核蛋白的慢病毒注射到小鼠受精卵卵周隙中，培养至2细胞期后移植入假孕ICR母鼠的输卵管内，按SPF动物饲养条件喂养产仔后检测，鉴定筛选出阳性小鼠，即得核定位人源α突触核蛋白转基因小鼠。
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