[发明专利]一种药用红树来源真菌中联苯醚类化合物及其制备方法与应用

说明书

本发明涉及一种药用红树来源真菌中联苯醚类化合物及其制备方法与应用。所述联苯醚类化合物结构如下：

技术领域

本发明属于红树真菌次级代谢产物领域，具体涉及一种药用红树来源真菌中联苯醚类化合物及其制备方法与应用。

背景技术

红树植物生长于热带亚热带潮间带，其生存环境具有高压、高盐、低氧等特点，使得其内生真菌具有独特的代谢途径，进而具有产生结构新颖、生物活性多样的化合物的能力，其代谢产物具有抗菌、抗肿瘤、免疫调节、酶抑制等多种药用价值，是潜在的微生物药物开发资源，因此，红树植物内生真菌将成为新药研发的重要资源之一。

发明内容

本发明提供一种同时制备联苯醚类化合物1和2的方法，其特征在于包括如下步骤：

(1)将真菌TGGP35菌株接入发酵培养基中，于26～28℃静置培养28～30天得发酵物；

(2)将步骤(1)得到的发酵物用1-2倍体积的乙酸乙酯萃取2～4次，合并乙酸乙酯相后减压浓缩得到浸膏；

(3)步骤(2)得到的浸膏经过减压硅胶柱层析，采用石油醚-乙酸乙酯作为洗脱剂进行梯度洗脱，洗脱梯度分别为100:0、90:10、80:20、70:30、60:40，50:50、40:60、30:70、20:80、10:90、0:100，每个梯度收集两个柱体积，根据极性大小分成10个组分，其中梯度40:60得到的洗脱液浓缩后，先经正相硅胶柱层析，洗脱剂为石油醚：乙酸乙酯＝2:1-1:1的混合溶剂，洗脱4-5个柱体积，减压浓缩后再经Sephadex LH-20凝胶柱层析，洗脱剂为石油醚：CHCl₃:MeOH＝2:1:1的混合溶剂，洗脱4个柱体积，减压浓缩后再经高效液相色谱HPLC制备，色谱柱为Waters C18，9.4×250mm，7μm，流速为2mL/min，流动相为MeOH:H₂O＝65:35，得到化合物1和化合物2；化合物1和化合物2结构如下：

其中所述洗脱剂或流动相的比例均为体积比；所述发酵培养基为马铃薯液体培养基(配方为每百毫升中含马铃薯2g、蛋白胨0.5g、海盐0.3g，余量为水)。

本发明的另一实施方案提供一种真菌TGGP35发酵粗提物，其特征在于该粗提物的制备方法包括如下步骤：

(1)将真菌TGGP35菌株接入发酵培养基中，于26～28℃静置培养28～30天得发酵物；

(2)将步骤(1)得到的发酵物用1-2倍体积的乙酸乙酯萃取2～4次，合并乙酸乙酯相后减压浓缩得到浸膏；即为所述粗提物。

所述发酵培养基为马铃薯液体培养基(配方为每百毫升中含马铃薯2g、蛋白胨0.5g、海盐0.3g，余量为水)。

本发明提供一种抗肿瘤药物，其特征在于以上述联苯醚类化合物1和/或2、或其药学上可接受的盐或上述粗提物作为有效成分。

本发明提供的上述抗肿瘤药物，还包含其他抗肿瘤药物；也可以包含药学上可接受的载体或赋形剂。

本发明的另一实施方案提供所述的联苯醚类化合物1和/或2、或其药学上可接受的盐或上述粗提物在制备抗肿瘤药物中的用途。

本发明中术语“药学上可接受的盐”是指非毒性的无机或有机酸和/或碱的加成盐，可参见“Salt selection for basic drugs”,Int.J.Pharm.(1986),33,201–217。