[发明专利]一种磁珠法核酸提取试剂盒及其应用

说明书

本发明属于分子生物学技术领域，具体涉及一种磁珠法核酸提取试剂盒及其应用。本发明提供了一种组合物，包含以下体积百分比的组分：20～80％甘油和20～60％乙醇。该组合物作为核酸提取中的清洗液可以提高核酸提取的质量，提取核酸的质量与全自动核酸提取仪的质量相当，并且手动提取核酸的整个过程约5min，同时，其可以与核酸提取仪联用，可以进一步将时间缩短为3～5分钟；该组合物可用于制备用于核酸提取的产品(试剂、试剂盒、系统)。

技术领域

本发明属于分子生物学技术领域，具体涉及一种磁珠法核酸提取试剂盒及其应用。

背景技术

核酸是一类生物聚合物，是所有已知生命必不可少的组成物质，广泛存在于动植物细胞、微生物体内，分为脱氧核糖核酸(DNA)和核糖核酸(RNA)。目前，在分子生物学科的各个研究检测领域都离不开核酸的检测，核酸的提取纯化是分子生物学研究和临床检测的基础。

目前全国乃至全球对于核酸样本处理的卡脖子问题就是时间太长、步骤繁琐，操作复杂。免提取快速处理法(常规需要5-10分钟)存在效果差、提取的核酸量少且纯度较低，容易导致漏检错检等问题。现有的核酸提取方法主要包括碱裂解法、酚氯仿抽提法、螯合树脂法、离心柱膜吸附法以及磁珠法等。其中，碱裂解法等由于在提取过程中使用了有毒有害的有机溶剂，具有核酸质量不佳、操作步骤繁琐、耗时较长的缺陷。相较于其他方法，磁珠法操作更为简便，能够保证核酸的质量，适用于多种样品类型，并且对样品要求较低，但是，存在操作步骤繁琐，时间长(普遍约30～60分钟)等问题。因此，有必要开发一种保证核酸质量、提取速度快的核酸提取试剂和方法。

发明内容

本发明第一方面的目的，在于提供甘油在制备清洗液中的应用。

本发明第二方面的目的，在于提供一种组合物。

本发明第三方面的目的，在于提供本发明第二方面的组合物的应用。

本发明第四方面的目的，在于提供一种试剂。

本发明第五方面的目的，在于提供一种试剂盒。

本发明第六方面的目的，在于提供一种检测系统。

本发明第七方面的目的，在于提供一种核酸提取方法。

为了实现上述目的，本发明所采取的技术方案是：

本发明的第一个方面，提供甘油在作为和/或制备清洗液中的应用，所述清洗液用于核酸提取。

发明人首次发现甘油可以作为清洗液的主要成分，用于核酸提取，并且与传统的清洗液相比，在减少清洗次数的情况下，其核酸提取质量反而更高。

优选地，所述清洗液用于磁珠法核酸提取。

优选地，所述甘油在所述清洗液中的含量为20～80v/v％；进一步为25～75v/v％；更进一步为40～50v/v％；再进一步为50v/v％。

优选地，所述甘油为无水甘油。

优选地，所述清洗液还包含乙醇。

优选地，所述乙醇在所述清洗液中的含量为20～60v/v％；进一步为25～50v/v％；更进一步为50v/v％。

优选地，所述乙醇为无水乙醇。

优选地，所述清洗液还包含水。

优选地，所述水的用量为余量。

优选地，所述核酸包含DNA和RNA中的至少一种。

优选地，所述核酸来自细胞、细菌、真菌、DNA病毒、RNA病毒中的至少一种；进一步优选地，所述核酸来自DNA病毒。