[发明专利]一种利用丝状真菌亚麻刺盘孢ST-1合成11α,17α-diOH-黄体酮的方法

说明书

本发明公开了一种利用丝状真菌亚麻刺盘孢ST‑1合成11α,17α‑diOH‑黄体酮的方法，本发明属生物技术领域。涉及一株丝状真菌亚麻刺盘孢ST‑1高效转化17α‑OH‑黄体酮生成11α,17α‑diOH‑黄体酮的应用，该菌株保藏在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏号为CGMCC No.6051。亚麻刺盘孢(Colletotrichum lini)ST‑1能转化17α‑OH‑黄体酮生成11α,17α‑diOH‑黄体酮，在底物投料量为40g/L的条件下，产物浓度达到34.80g/L，底物转化率达到100％，经助溶剂种类优化，确定了最优助溶条件(1％DMF(v/v))下的产物浓度为38.24g/L，是亚麻刺盘孢转化17α‑OH‑黄体酮生成11α,17α‑diOH‑黄体酮的首次报道。

技术领域

本发明属于生物技术领域，具体涉及利用一株亚麻刺盘孢(Colletotrichumlini)ST-1转化底物17α-OH-黄体酮为11α,17α-diOH-黄体酮的方法。

背景技术

黄体酮作为甾体类药物孕甾烷系列中的一种重要的孕激素，对于维持性周期和妊娠起着重要的作用，被视为激素类药物的平衡器，其结构为孕甾-4-烯-3,20-二酮。有研究表明，由黄体酮衍生而来的化合物具有广泛的生物活性，例如在治疗外伤性脑损伤中的神经保护作用以及潜在的抗炎和抗菌等活性。

11α,17α-diOH-黄体酮作为黄体酮衍生物中的一种，是生产多种皮质激素，包括地塞米松、倍他米松、6α-甲基氢化泼尼松、泼尼松、氢化泼尼松等药物产品的重要中间体。

微生物法较化学法合成甾体药物具有特异性强，绿色环保，反应条件温和，区域/立体选择性强等优势。在目前报道的研究中，可以实现11α,17α-diOH-黄体酮的生产的菌株较少，且存在转化效率低的问题，严重制约着生产的需求和发展。亚麻刺盘孢菌具有底物谱广，特异性强，转化率高的特点，可用于转化多种甾体类化合物。

本发明所涉及的利用亚麻刺盘孢ST-1转化底物17α-OH-黄体酮为11α,17α-diOH-黄体酮方法还未见报道。

发明内容

发明目的：本发明的目的在于提供一种亚麻刺盘孢(Colletotrichum lini)ST-1高效转化17α-OH-黄体酮生成11α,17α-diOH-黄体酮的方法，可以实现较高的底物转化率和产物产量。

技术方案：为实现上述目的，本发明采用的技术方案为：

本发明的第一个目的是，提供一种微生物转化17α-OH-黄体酮的方法，保藏编号为CGMCC NO.6051的丝状真菌亚麻刺盘孢(Colletotrichum lini)ST-1经活化培养和发酵培养，以17α-OH-黄体酮为底物，经生物转化生成11α,17α-diOH-黄体酮。

可选的，在本申请的一种实施例中，所述丝状真菌亚麻刺盘孢(Colletotrichumlini)ST-1于2012年4月24日保藏在位于北京市朝阳区北辰西路1号院3号的中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为CGMCC NO.6051；保藏名称为亚麻刺盘孢(Colletotrichum lini)ST-1。

可选的，在本申请的一种实施例中，所述底物的浓度为10-60g/L。

可选的，在本申请的一种实施例中，所述底物的浓度为10-40g/L。

可选的，在本申请的一种实施例中，具体方法包括：制备亚麻刺盘孢(Colletotrichum lini)ST-1菌株的一级种子液，转入新鲜的发酵培养基中培养获得二级种子液，随后转入新鲜的发酵培养基培养，再加入底物17α-OH-黄体酮，经生物转化后获得转化液。