[发明专利]一种提高GLP-1 Fc融合蛋白产量的方法在审
| 申请号： | 202211732669.0 | 申请日： | 2022-12-30 |
| 公开（公告）号： | CN116200396A | 公开（公告）日： | 2023-06-02 |
| 发明（设计）人： | 马晓楠;马宁宁 | 申请（专利权）人： | 沈阳药科大学 |
| 主分类号： | C12N15/12 | 分类号： | C12N15/12;C12N5/10;C07K19/00;C12N15/85;C12N5/071 |
| 代理公司： | 北京中济纬天专利代理有限公司 11429 | 代理人： | 覃婧婵 |
| 地址： | 110016 辽*** | 国省代码： | 辽宁;21 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 提高 glp fc 融合 蛋白 产量 方法 | ||
1.一种提高GLP-1Fc融合蛋白产量的方法，其特征在于：所述方法包括在CHO细胞中敲低medag基因并得到稳定低表达该基因的细胞株，所述medag基因编码肠系膜雌激素依赖的脂肪形成蛋白。
2.根据权利要求1所述的方法，所述低表达细胞株相比于未敲低medag基因的原始细胞株，medag基因的表达降低20-50％。
3.根据权利要求1所述的方法，所述低表达细胞株相比于未敲低medag基因的原始细胞株，medag基因的表达降低25-35％。
4.根据权利要求1-3任意一项所述的方法，其特征在于：所述medag基因序列如SEQ IDNO：1中所示。
5.根据权利要求4所述的方法，其特征在于：所述medag基因利用CRISPR-Cas9技术将CHO细胞中的内源性medag基因的表达水平降低。
6.根据权利要求5所述的方法，其特征在于：所述方法包括利用qPCR对筛选出的细胞株进行medag基因mRNA表达水平的检测。
7.根据权利要求6所述的方法，其特征在于：所述方法包括利用WB对筛选出的细胞株进行MEDAG蛋白表达水平的检测。
8.一种CHO细胞，其特征在于：所述CHO细胞中低表达medag基因，所述medag基因编码肠系膜雌激素依赖的脂肪形成蛋白。
9.权利要求8所述的CHO细胞在提高重组蛋白的产量中的应用。
10.根据权利要求9所述的应用，其特征在于：所述重组蛋白是GLP-1Fc融合蛋白。
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