[发明专利]岩黄连指纹图谱的检测方法

权利要求书

1.一种岩黄连指纹图谱的建立方法，其特征在于，包括以下步骤：

步骤1、岩黄连供试品溶液的制备：

精密称取不同批次的岩黄连，加体积百分比为50％-100％的乙醇，超声，用微孔滤膜滤过，取续滤液，得供试品溶液；

步骤2、混合标准品溶液的制备：

精密称定脱氢甲卡维汀、脱氢异阿朴卡维汀、脱氢卡维丁、盐酸巴马汀、盐酸小檗碱标准品，置于容量瓶中，用甲醇定容至刻度，摇匀，制成混合标准品溶液；

步骤3、精密吸取步骤2的混合标准品溶液，注入高效液相色谱仪，记录混合标准品色谱图；

步骤4，分别精密吸取步骤1的各批次供试品溶液，注入高效液相色谱仪，记录供试品色谱图；

步骤5，将步骤4中获得的供试品色谱图导入中药色谱指纹图谱相似度评价系统；选择不同批次岩黄连供试品的色谱图中均存在的色谱峰作为共有峰；用平均值计算法生成岩黄连的对照指纹图谱，计算各共有峰的相对保留时间和相对峰面积；并根据混合标准品溶液色谱图的保留时间，标注岩黄连的对照指纹图谱中峰的化学成分，得到岩黄连的指纹图谱。

2.根据权利要求1所述的岩黄连指纹图谱的建立方法，其特征在于，步骤1中所述岩黄连经粉碎；所述乙醇体积百分比为50％-80％；所述超声时间不低于15min；所述岩黄连的质量M与乙醇的体积V的比例为M:V＝1g/(100-250)mL；优选的，所述岩黄连粉末过三号筛；优选的，超声时间为15-60min。

3.根据权利要求1所述的岩黄连指纹图谱的建立方法，其特征在于，步骤2混合标准品溶液的浓度为脱氢甲卡维汀100ug/ml、脱氢异阿朴卡维汀40ug/ml、脱氢卡维丁160ug/ml、盐酸巴马汀100ug/ml、盐酸小檗碱20ug/ml。

4.根据权利要求1所述的岩黄连指纹图谱的建立方法，其特征在于，步骤3、步骤4中，液相色谱条件为：

色谱柱：十八烷基硅烷键合硅胶色谱柱；

流动相：A相为体积分数为0.01-0.05mol/L的磷酸二氢钾水溶液，B相为乙腈；

洗脱程序：采用体积分数30-95％A相，5-70％B相，梯度洗脱；

流速：0.8-1.2mL/min；

柱温：30-40℃；

进样体积：10-20μL；

检测波长：345±5nm。

5.根据权利要求4所述的岩黄连指纹图谱的建立方法，其特征在于，所述流动相为0.05mol/L磷酸二氢钾水溶液(A)-乙腈(B)。

6.根据权利要求4所述的岩黄连指纹图谱的建立方法，其特征在于，所述洗脱程序为：

7.根据权利要求4所述的岩黄连指纹图谱的建立方法，其特征在于，所述流速为1ml/min，柱温为30℃，进样体积为10μL，检测波长为345nm。

8.采用权利要求1所述的建立方法得到的岩黄连指纹图谱。

9.根据权利要求8所述的岩黄连指纹图谱，其特征在于，所述岩黄连指纹图谱中共有峰17个，识别5个成分，其中脱氢甲卡维汀保留时间为33.925为10号峰；脱氢异阿朴卡维汀的保留时间为35.200min，为11号峰；脱氢卡维丁的保留时间为41.800min，为14号峰；盐酸巴马汀的保留时间为45.250min，为16号峰；盐酸小檗碱的保留时间为46.650min，为17号峰。

10.权利要求8所述的岩黄连指纹图谱在中药岩黄连质量控制中的应用。