[发明专利]一种微囊藻的固定化保存方法及恢复培养方法在审
| 申请号： | 202211680420.X | 申请日： | 2022-12-29 |
| 公开（公告）号： | CN116179426A | 公开（公告）日： | 2023-05-30 |
| 发明（设计）人： | 刘红兵;于秋香;董雪怡;高伟 | 申请（专利权）人： | 青岛普瑞邦生物工程有限公司 |
| 主分类号： | C12N1/20 | 分类号： | C12N1/20;C12N1/04;C12N1/02;C12N11/10;C12N11/04;C12R1/01 |
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| 地址： | 266100 山东省青岛市高新*** | 国省代码： | 山东;37 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 微囊藻 固定 保存 方法 恢复 培养 | ||
1.一种微囊藻的固定化保存方法，其特征在于，包括如下步骤：
固定化凝胶的制备：将水溶性高分子固定剂溶于水中，加入氯化钠后，搅拌均匀，得到固定化凝胶备用；
微囊藻浓缩液的制备：将微囊藻藻液经过浓缩后，得到微囊藻浓缩液；
胶-藻混合液的制备：将微囊藻浓缩液与固定化凝胶以1:5-10的体积比混合均匀，得到胶-藻混合液；
固定化胶珠的制备：将胶-藻混合液挤入钙离子的水溶液中，到固定化胶珠；将固定化胶珠经过洗涤后，低温保存即可。
2.根据权利要求1所述的一种微囊藻的固定化保存方法，其特征在于，所述水溶性高分子固定剂、氯化钠以及水的重量比为2-5:1-3:100。
3.根据权利要求1所述的一种微囊藻的固定化保存方法，其特征在于，所述水溶性高分子固定剂包括藻酸盐、琼脂、琼脂糖、角叉藻聚糖、明胶、聚丙烯酰胺中的一种。
4.根据权利要求1所述的一种微囊藻的固定化保存方法，其特征在于，所述微囊藻藻液采用如下方法进行浓缩处理：将微囊藻藻液在4000-6000r/min的速度下离心10-20min，弃去上清液，得到微囊藻浓缩液。
5.根据权利要求4所述的一种微囊藻的固定化保存方法，其特征在于，所述微囊藻藻液采用如下方法制备：将微囊藻接种于BG11培养基中，在温度为23-25℃、光照为60-70μmol·m-2·s-1、光照周期为10-16h/d的条件下，培养10-14天，得到微囊藻藻液。
6.根据权利要求5所述的一种微囊藻的固定化保存方法，其特征在于，所述微囊藻与BG11培养基的体积比为1:8-12。
7.根据权利要求1所述的一种微囊藻的固定化保存方法，其特征在于，所述钙离子的水溶液为浓度为2wt％的氯化钙的水溶液。
8.一种微囊藻固定化胶珠的恢复培养方法，其特征在于，将权利要求1所述的固定化胶珠与柠檬酸盐的水溶液混合，完全溶解后，加入BG11培养基，离心后，对藻液进行洗涤；
将洗涤后的藻液加入BG11培养基中静置，使藻液澄清；取澄清后的上清藻液，可进行再培养。
9.根据权利要求8所述的一种微囊藻固定化胶珠的恢复培养方法，其特征在于，所述固定化胶珠(质量g)与柠檬酸盐的水溶液(体积mL)的用量比为1:15-25。
10.根据权利要求8所述的一种微囊藻固定化胶珠的恢复培养方法，其特征在于，所述柠檬酸盐的水溶液的浓度为3-5wt％。
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