[发明专利]一种mRNA纯化方法

权利要求书

1.一种mRNA纯化方法，其特征在于，所述mRNA纯化方法包括：

将待纯化mRNA与硫酸铵混合，收集沉淀，得到纯化mRNA。

2.根据权利要求1所述的mRNA纯化方法，其特征在于，所述mRNA来源于真菌、细菌、植物或者动物的mRNA中的任意一种或至少两种的组合；

优选地，所述mRNA来源于体外转录混合体系；

优选地，所述体外转录体系包括转录后加尾和/或加帽的混合物；

优选地，所述体外转录体系还包括DNA模板、T7聚合酶、NTP和盐。

3.根据权利要求1或2所述的mRNA纯化方法，其特征在于，所述mRNA纯化方法包括如下步骤：

(1)将含有硫酸铵的沉淀剂溶液与待纯化mRNA混合，收集沉淀；

(2)将所述沉淀与复溶溶液混合，得到纯化mRNA。

4.根据权利要求3所述的mRNA纯化方法，其特征在于，步骤(1)中所述含有硫酸铵的沉淀剂溶液的pH为3-10。

5.根据权利要求3或4所述的mRNA纯化方法，其特征在于，步骤(1)中所述混合的温度为0-40℃。

6.根据权利要求3-5中任一项所述的mRNA纯化方法，其特征在于，步骤(1)中所述混合的时间为0.5-10h。

7.根据权利要求3-6中任一项所述的mRNA纯化方法，其特征在于，所述含有硫酸铵的沉淀剂溶液中硫酸铵的终浓度为0.5-4M。

8.根据权利要求3-7中任一项所述的mRNA纯化方法，其特征在于，步骤(1)还包括对所述沉淀进行洗涤的步骤；

优选地，所述洗涤的溶液包括乙醇；

优选地，所述乙醇包括冷乙醇；

优选地，所述乙醇浓度为70-80％。

9.根据权利要求3-8中任一项所述的mRNA纯化方法，其特征在于，所述含有硫酸铵的沉淀剂溶液中还含有无机盐缓冲液；

优选地，所述无机盐缓冲液包括Tris-HCl、柠檬酸、醋酸盐、磷酸盐或HEPES中的任意一种或至少两种的组合；

优选地，所述醋酸盐包括醋酸钠、醋酸铵、或醋酸钾中的任意一种或至少两种的组合；

优选地，所述磷酸盐包括磷酸二氢钠、磷酸氢二钠、或磷酸二氢钾中的任意一种或至少两种的组合；

优选地，所述无机盐缓冲液浓度为0.01-1M。

10.根据权利要求3-9任一项所述的mRNA纯化方法，其特征在于，所述复溶溶液包括无菌无酶水和/或缓冲溶液；

优选地，所述缓冲溶液包括Tris-HCl、柠檬酸、醋酸盐、磷酸盐或HEPES中的任意一种或至少两种的组合；

优选地，所述醋酸盐包括醋酸钠、醋酸铵、或醋酸钾中的任意一种或至少两种的组合；

优选地，所述磷酸盐包括磷酸二氢钠、磷酸氢二钠、或磷酸二氢钾中的任意一种或至少两种的组合。