[发明专利]HPLC分离测定替尼类关键中间体及其相关杂质的方法

权利要求书

1.一种替尼类关键中间体的检测方法，所述方法为采用HPLC分离测定替尼类关键中间体I及其相关杂质的方法，采用的色谱柱是以辛烷基硅烷键合硅胶为填充剂，采用流动相A与流动相B进行梯度洗脱，进入检测器进行检测；所述相关杂质包括杂质A、杂质B、杂质C、杂质D、杂质E中的一种或者多种，具体结构式如下所示：

所述流动相A为磷酸盐缓冲液与有机溶剂的混合溶剂，所述流动相B为有机溶剂，

所述替尼类关键中间体I为(4-(1H-吡唑-4-基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基)新戊酸甲酯，结构式如式(Ⅰ)所示：

所述梯度洗脱设置如下：

所述流动相进行洗脱的流速为0.8-1.2ml/min。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述流动相A为磷酸盐缓冲液和乙腈混合物，所述磷酸盐缓冲液和乙腈体积比为95:5，所述流动相B为乙腈。

3.根据权利要求2所述的方法，其特征在于，所述磷酸盐缓冲液为用磷酸调节pH值至2.3-2.7的磷酸二氢钾水溶液。

4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述梯度洗脱设置如下：

5.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述辛烷基硅烷键合硅胶的填料颗粒粒径为2-5μm；所述色谱柱的柱温为25-35℃。

6.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述检测器的检测波长为220±5nm。

7.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述相关杂质为杂质A、杂质B、杂质C、杂质D、杂质E对照品，具体包括以下步骤：

1)配制供试品溶液：取供试样品溶于稀释剂中，制成每1ml中约含0.5mg的溶液，得供试品溶液；

2)配制对照溶液：取供试品溶液适量，用稀释剂稀释制成每1ml中约含5μg的溶液，作为对照溶液；

3)配制系统适用性溶液：取替尼关键中间体I及其杂质A、杂质B、杂质C、杂质D、杂质E，用稀释剂溶解稀释制成系统适用性溶液；

4)取步骤3)所述系统适用性溶液进样，进行高效液相色谱分析，记录色谱图，确定替尼关键中间体I及其杂质的保留时间，再分别取步骤1)所述供试品溶液和步骤2)所述对照溶液进样，按主成分自身对照法计算供试品溶液中替尼关键中间体I中杂质的含量，

所述稀释剂为乙腈-水体积比为20：80的溶液。