[发明专利]一种葛根总黄酮的含量测定方法

说明书

本发明提供了一种葛根总黄酮的含量测定方法。通过检测葛根中总黄酮的含量，达到有效地控制产地葛根药材质量的目的。本发明总黄酮(以葛根素计)在1.60～22.40μg/mL浓度范围内与吸光度线性关系良好，线性方程为y＝0.0709255x+0.00378142，R²＝0.99974；精密度RSD为0.02％，稳定性RSD为1.10％，重复性RSD为1.79％，方法专属性强，精密度高，稳定性好，重复性好。本发明的方法具体操作简便，试剂和设备成本低廉，适用于实验室以及工业大生产中葛根的质量控制。

技术领域：

本发明属于中药材检测技术领域，具体涉及一种葛根总黄酮的含量测定方法。

背景技术：

葛根(PuerariaeLobataeRadix)是豆科植物野葛(PuerariaLobata(Willd)Ohwi)的干燥根。葛根中含有丰富的营养成分，《神农本草经》中记载葛根可“主消渴、身大热、呕吐、诸痹、起阴气、解诸毒”。现代医学研究表明其在心血管疾病的治疗中具有显著作用，也被应用于解酒、免疫调节、肝脏保护、抗糖尿病、抗肿瘤、抗病毒、抗炎等方面，是我国应用最为广泛的中药材之一。

现代科学研究证明，根中存在诸多化学成分，除淀粉外，还有异黄酮类、三萜类、香豆素类、皂苷类、生物碱类、多糖类及人体所必需的氨基酸和矿物质等。目前我国葛根种植地域众多，而各地种植的葛根药材的化学成分及含量均有差异，若化学成分和含量不能达到质量要求，势必会影响临床应用的安全性以及有效性。为确保中药使用的安全有效，对中药材进行准确可靠的质量检测是十分必要。

目前，《中国药典》仅制定了采用液相色谱对葛根中葛根素进行含量测定的方法，为了更好地控制药材质量，有必要对葛根中的主要药效成分总黄酮进行含量测定，以进一步有效地控制葛根质量，从而保证临床用药疗效。

发明内容：

本发明要解决的技术问题是提供一种葛根总黄酮的含量测定方法。该方法操作简便，试剂和设备成本低廉，测定葛根总黄酮稳定性好，便于推广。

本发明提供的技术方案是：

一种葛根总黄酮的含量测定方法，包括如下步骤：

(1)绘制标准曲线：精密称定葛根素对照品10mg，加溶剂制成80μg/mL的葛根素对照品母液，取适量对照品母液用溶剂稀释为浓度为1.60～22.40μg/mL的系列标准溶液，以溶剂为空白对照，在190～400nm用紫外-可见分光光度计测定吸光度，绘制标准曲线，得到线性回归方程；

(2)供试品溶液的制备：精密称取过三号筛的葛根药材粉末适量，置于具塞锥形瓶中，精密加入溶剂50ml，称定重量，提取15～45min，放冷，再称定重量，用溶剂补足减失重量，摇匀，滤过，精密吸取滤液0.5ml，置于50ml量瓶中，加溶剂至刻度，摇匀，即得；

(3)供试品的测定：在190～400nm用紫外-可见分光光度计测定步骤(2)所述供试品溶液的吸光度，根据线性回归方程计算样品中总黄酮的含量。

优选为，所述紫外-可见分光光度计的检测波长为250～350nm。

进一步优选为，所述紫外-可见分光光度计的检测波长为250nm。

本发明所用溶剂为水或30％～95％乙醇。

优选为，溶剂为30％～75％乙醇。

进一步优选为，溶剂为30％乙醇。

上述步骤(2)中，所述提取方法为加热回流或超声提取。

优选为，步骤(2)中，提取方法为加热回流，提取时间为30min。