[发明专利]一种白介素-6的检测方法及试剂盒

权利要求书

1.一种白介素-6的检测方法，其特征在于：所述检测方法包括以下步骤：

步骤1、将待测样本、生物素化抗体和酶标记抗体加入至化学发光微孔板中混匀；

所述生物素化抗体为生物素与白介素-6单克隆抗体偶联得到的产物；

所述酶标记抗体为辣根过氧化物与白介素-6单克隆抗体偶联得到的产物；

步骤2、进行孵育：在37℃的温度下，一起孵育10min；

步骤3、进行清洗：将清洗液加入到微孔中，将未结合在固相上的抗体和被测样本清除；

步骤4、进行读数：加入发光底物，酶催化底物发光，通过光电倍增器测量发光强度；

步骤5、利用已知浓度的校准品绘制发光强度标准曲线，根据步骤4得到的发光强度对照所述发光强度标准曲线，计算得出待测样本中的白介素-6含量。

2.根据权利要求1所述的一种白介素-6的检测方法，其特征在于：所述化学发光微孔板为包被有牛血清白蛋白和链霉亲和素的偶联产物。

3.根据权利要求2所述的一种白介素-6的检测方法，其特征在于：所述链霉亲和素的包被量约为3.8μg/孔。

4.根据权利要求1所述的一种白介素-6的检测方法，其特征在于：所述校准品包括浓度约为0pg/mL、5pg/mL、40pg/mL、200pg/mL、1000pg/mL和5000pg/mL的白介素-6抗原溶液。

5.根据权利要求1所述的一种白介素-6的检测方法，其特征在于：所述生物素化抗体为含有2μg/g白介素-6抗体(鼠源)、11.33mg/g三羟甲基氨基甲烷、5.47mg/g氯化钠、4.68mg/g牛血清白蛋白、4.69μL/g羊血清、4.7μL/g马血清、0.94μL/gPC300抑菌剂和28.2μL/g新生牛血清的水溶液。

6.根据权利要求1所述的一种白介素-6的检测方法，其特征在于：所述酶标记抗体为含有2μg/g白介素-6抗体(山羊源)-辣根过氧化酶偶联物、11.32mg/g三羟甲基氨基甲烷、5.46mg/g氯化钠、4.68mg/g牛血清白蛋白、4.69μL/g羊血清、4.7μL/g马血清、28.17μL/g新生牛血清、0.01μg/g铁氰化钾和0.01μL/g PC300抑菌剂的水溶液。

7.根据权利要求1所述的一种白介素-6的检测方法，其特征在于：所述发光底物包括溶液A和溶液B，所述溶液A为含有0.4％鲁米诺，pH 9.0的水溶液，所述溶液B为含有0.06％Na2B4O7，pH 5.0的水溶液；所述洗液为含1％吐温20和0.1％Proclin300的0.05M、pH值为7.5的Tris-HCl溶液。

8.根据权利要求1所述的一种白介素-6的检测方法，其特征在于：所述步骤5中校准品的反应条件为37℃下反应1分钟。

9.基于权利要求1-8中任意一项所述检测方法的一种白介素-6的检测试剂盒，其特征在于：所述试剂盒包括化学发光微孔板、生物素化抗体、酶标记抗体、校准品、发光底物和洗液。

10.根据权利要求9所述的一种白介素-6的检测试剂盒，其特征在于：所述发光底物和洗液均为独立包装。