[发明专利]羟基二苯乙烷制剂中多种有机杂质的定性及定量分析方法

说明书

本发明公开了一种对1‑(3,5‑二羟基‑4‑异丙基苯基)‑2‑苯基乙烷药物软膏制剂中的两种以上有机杂质同时进行定性和/或定量分析的方法，其特征在于，采用液相色谱质谱联用技术，其中，色谱条件如下：色谱柱：C18；流动相A：水；流动相B：乙腈；检测器：PDA/MS；采用梯度洗脱；质谱参数如下：离子源为APCI或ESI。本发明采用UPLC‑Q‑TOF技术，可以准确确定降解有机杂质分子量，从而确定有机杂质元素组成，根据已知化合物分子结构，可快速推测未知有机杂质潜在结构。

技术领域

本发明涉及一种羟基二苯乙烷制剂中多种有机杂质的定性及/或定量分析，特别是，采用液相色谱质谱联用技术对1-(3，5-二羟基-4-异丙基苯基)-2-苯基乙烷中的两种以上有机杂质进行定性及/或定量分析的方法。

背景技术

酚类化合物是芳烃的含羟基衍生物，根据其挥发性分挥发性酚和不挥发性酚。自然界中存在的酚类化合物大部分是植物生命活动的结果，植物体内所含的酚称内源性酚，其余称外源性酚。酚类化合物都具有特殊的芳香气味，均呈弱酸性，在环境中易被氧化。其中多酚类化合物，由40多种化学成分组成，具有抗氧化、强化血管壁、促进肠胃消化、降低血脂肪、与增加身体抵抗力，并防止动脉硬化、血栓形成的作用；还能利尿、降血压、抑制细菌与癌细胞生长，及帮助消化，广泛应用于医药，食品，化妆品行业。

酚是本身一种中等强度的化学毒物，与细胞原浆中的蛋白质发生化学反应。低浓度时使细胞变性，高浓度时使蛋白质凝固。酚类化合物可经皮肤粘膜、呼吸道及消化道进入体内。低浓度可引起蓄积性慢性中毒，高浓度可引起急性中毒以致昏迷死亡。一般来讲，酚进入人体后机体通过自身的解毒功能使之转化为无毒物质而排出体外。只有当摄入量超过解毒功能时才有蓄积而导致慢性中毒，酚类化合物在医药，食品及化妆品行业中广泛应用，由于酚类化合物的易氧化特性造成其具有不稳定性，容易受到氧化剂，光照等因素的影响而变质，产生一些已知或未知的成分，这些成分中，尤其是未知的化学成分其安全性没有评估，人体暴露在这些未知的物质中存在潜在的健康风险，因此需要对这些未知的成分进行研究，并对产品中该组分含量进行控制，以保证使用者的健康与安全。

化合物1-(3，5-二羟基-4-异丙基苯基)-2-苯基乙烷具有治疗免疫性疾病或炎症的活性。中国专利CN 103483158B公开了以下合成方法：

a).根据专利文献CN1688535A，2005；US7868047；US321，050；CA2393297；EP1490374；WO2004/031117；WO2002/057219和WO01/42231所记载的方法合成1-(3，5-二羟基-4-异丙基苯基)-2-苯基乙烯。

b).将1-(3，5-二甲氧基-4-异丙基苯基)-2-苯基乙烯(0.3克)溶解于50毫升甲醇之中，加入Pd/C(25mg，10％W/W)，放入加氢反应釜。在室温下向反应液中通入氢气，反应完成后，减压，打开加氢反应釜，反应液通过Celite(赛力特硅藻土)过滤，蒸干得1-(3，5-二甲氧基-4-异丙基苯基)-2-苯基乙烷。

c).将1-(3，5-二甲氧基-4-异丙基苯基)-2-苯基乙烷(3.0克)和吡啶盐酸盐(6.7克)的混合物在200℃，有氮气流保护的条件下加热2小时。反应混合物降到室温后，加入100毫升2N的盐酸和300毫升乙酸乙酯，将有机相和水相分开后，水相用150毫升乙酸乙酯萃取三次，合并萃取液，并用饱和食盐水洗涤，用硫酸钠干燥。蒸出乙酸乙酯后，残留物用柱色谱分离纯化，MeOH/CH₂Cl₂(V/V＝1：4)，得到1-(3，5-二羟基-4-异丙基苯基)-2-苯基乙烷。

UPLC-Q-TOF由UPLC(超高效液相色谱)，Q(四极杆)，TOF(飞行时间质谱)三部分组成，UPLC实验对样品中多组分的初次高效分离，四极杆实现对离子束的聚焦，TOF的原理是离子在电场作用下加速飞过飞行管道，根据到达检测器的飞行时间确定被测离子的质荷比(离子的质荷比(M/Z)与离子的飞行时间成正比)。