[发明专利]红景天挥发油在干预低氧诱导的肺动脉高压中的应用以及研究方法

权利要求书

1.红景天挥发油在制备干预低氧诱导的肺动脉高压药物中的应用。

2.红景天挥发油在干预低氧诱导的肺动脉高压中应用的研究方法，其特征在于，包括以下步骤：

S1.准备实验材料，建立HPH大鼠模型；

S2.对大鼠实验结果进行检测；

S3.进行肺动脉平滑肌细胞培养；

S4.对肺动脉平滑肌细胞进行对照实验并检测。

3.根据权利要求2所述的红景天挥发油在干预低氧诱导的肺动脉高压中应用的研究方法，其特征在于，步骤S1中包括：

S1.3建立HPH大鼠模型：将实验大鼠随机分为3组，分别为：对照组、低氧组和低氧+红景天挥发油组，将低氧组和低氧+红景天挥发油组大鼠饲养在低压舱内，连续4周。

4.根据权利要求3所述的红景天挥发油在干预低氧诱导的肺动脉高压中应用的研究方法，其特征在于，步骤S2中包括：

S2.1血流动力学检测：检测步骤S1.3中3组实验大鼠的平均肺动脉压；计算每只大鼠的右心室指数。

5.根据权利要求3所述的红景天挥发油在干预低氧诱导的肺动脉高压中应用的研究方法，其特征在于，步骤S2中还包括：

S2.2组织病理学染色检测：收集步骤S1.3中3组实验大鼠的肺组织，将肺组织分为两部分，一部分用于观察肺组织的形态学变化，另一部分用于观察肺组织的超微结构。

6.根据权利要求3所述的红景天挥发油在干预低氧诱导的肺动脉高压中应用的研究方法，其特征在于，步骤S2中还包括：

S2.3免疫印迹法检测：收集步骤S1.3中3组实验大鼠的肺组织，然后在RIPA缓冲液中均质，然后离心，之后测定蛋白的浓度，并将结果与常规样品进行比较；通过SDS-PAGE分离后，将蛋白质转移到聚二氟乙烯膜上，再用含脱脂奶粉的ten-20的tris缓冲盐水阻断，与ACE抗体、AngⅡ抗体、AT1R抗体、ACE2抗体、ACS抗体、MAS抗体、β-Actin抗体孵育，然后用山羊抗小鼠/1：5000的兔免疫球蛋白G孵育，使用增强化学发光试剂盒进行可视化，使用β-Actin评估等车道负荷。

7.根据权利要求3所述的红景天挥发油在干预低氧诱导的肺动脉高压中应用的研究方法，其特征在于，步骤S3中包括：收集步骤S1.3中对照组实验大鼠的肺动脉，进行肺动脉平滑肌细胞体外培养，采用第4代-第6代肺动脉平滑肌细胞进行后续实验步骤。

8.根据权利要求7所述的红景天挥发油在干预低氧诱导的肺动脉高压中应用的研究方法，其特征在于，步骤S4中包括：

S4.1细胞增殖检测：将步骤S3中的第4代-第6代肺动脉平滑肌细胞分为常氧组、常氧+VORA组、低氧组和低氧+VORA组，每组细胞用无血清DMEM孵育，使细胞粘附后细胞同步，然后用VORA在常氧或低氧条件下处理细胞12h和24h，采用普通DMEM作为阴性对照，随后用10μLMTS在37℃下处理细胞，测定吸光度。

9.根据权利要求7所述的红景天挥发油在干预低氧诱导的肺动脉高压中应用的研究方法，其特征在于，步骤S4中还包括：

S4.2氧化应激检测：将步骤S3中的第4代-第6代肺动脉平滑肌细胞分为常氧组、常氧组+VORA组、低氧组和低氧+VORA组，按照各组的实验条件要求进行培养，之后对每组肺动脉平滑肌细胞中的MDA含量、SOD和GSH-Px活性进行测定。

10.根据权利要求7所述的红景天挥发油在干预低氧诱导的肺动脉高压中应用的研究方法，其特征在于，步骤S4中还包括：

S4.3免疫印迹法检测：将步骤S3中的第4代-第6代肺动脉平滑肌细胞分为常氧组、常氧组+VORA组、低氧组和低氧+VORA组，按照各组的实验条件要求进行培养，之后对每组肺动脉平滑肌细胞进行免疫印迹法检测，过程与S2.3中的免疫印迹法检测方法的过程相同。