[发明专利]一种扩张性/肥厚型心肌病基因突变猪成纤维细胞系的构建方法在审
| 申请号： | 202211546593.2 | 申请日： | 2022-12-05 |
| 公开（公告）号： | CN116121249A | 公开（公告）日： | 2023-05-16 |
| 发明（设计）人： | 庄乐南;巩倩;刘艳;金佳敏;贺津;王华南 | 申请（专利权）人： | 浙江大学 |
| 主分类号： | C12N15/113 | 分类号： | C12N15/113;C12N15/85;C12N5/10;C12Q1/02;A01K67/027;A61K49/00;C12N9/22;C12N15/12 |
| 代理公司： | 北京挺立专利事务所(普通合伙) 11265 | 代理人： | 程武红 |
| 地址： | 310030 浙江*** | 国省代码： | 浙江;33 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 扩张 肥厚 心肌 基因突变 纤维 细胞系 构建 方法 | ||
【权利要求书】：
1.靶向敲除CSRP3基因的sgRNA，其特征在于，所述sgRNA的核苷酸序列为SEQ ID NO:1和/或SEQ ID NO:2。
2.编码权利要求1所述sgRNA的DNA分子。
3.含有权利要求2所述DNA的载体。
4.根据权利要求3所述的载体，其特征在于，所述载体为px459。
5.一种敲除了CSRP3基因的细胞的构建方法，其特征在于，包括如下步骤：
利用CRISPR-Cas9系统敲除所述细胞的CSRP3基因，所述CRISPR-Cas9系统使用的sgRNA的核苷酸序列为SEQ ID NO:1和/或SEQ ID NO:2。
6.根据权利要求5所述的构建方法，其特征在于，所述利用CRISPR-Cas9系统敲除所述细胞的CSRP3基因中使用px459载体。
7.根据权利要求5或6所述的构建方法，其特征在于，所述细胞为猪胚胎成纤维细胞。
8.权利要求5-7任一项所述的构建方法构建得到的细胞。
9.权利要求8所述的细胞在构建CSRP3基因突变动物模型或DCM/HCM药物筛选中的应用。
10.根据权利要求9所述的应用，其特征在于，所述动物模型为猪模型。
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