[发明专利]布鲁氏菌抗体凝胶检测试剂及布鲁氏菌抗体凝胶检测方法在审
| 申请号: | 202211537408.3 | 申请日: | 2022-12-01 |
| 公开(公告)号: | CN115825436A | 公开(公告)日: | 2023-03-21 |
| 发明(设计)人: | 刘强;廖南山;林锋;柯海婷;陈琼娣;汤习锋;马海波 | 申请(专利权)人: | 珠海朗泰生物科技有限公司 |
| 主分类号: | G01N33/569 | 分类号: | G01N33/569;G01N33/543;G01N33/531 |
| 代理公司: | 北京市立方律师事务所 11330 | 代理人: | 王宝云 |
| 地址: | 519099 广东省珠海市高新区唐家湾镇*** | 国省代码: | 广东;44 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 布鲁氏菌 抗体 凝胶 检测 试剂 方法 | ||
本发明公开了医疗检测技术领域的一种布鲁氏菌抗体凝胶检测试剂及布鲁氏菌抗体凝胶检测方法,该布鲁氏菌抗体凝胶检测试剂包括微球凝胶、凝胶缓冲液、抗人球蛋白试剂及布鲁氏菌抗原试剂,凝胶缓冲液以PBS缓冲液为基底,PBS缓冲液中含有EDTA二钠、牛血清蛋白、PVP。该布鲁氏菌抗体凝胶检测方法包括在微球凝胶中加入凝胶缓冲液与抗人球蛋白试剂的混合物,进行离心后滴加待测血样和布鲁氏菌抗原试剂,进行离心后根据微球凝胶上部是否形成凝集物来判断检测结果。本发明的布鲁氏菌抗体凝胶检测试剂具有高特异性、高灵敏度、抗干扰性强,检测方法操作便捷、快速准确。
技术领域
本发明涉及布鲁氏菌检测技术领域,尤其涉及一种布鲁氏菌抗体凝胶检测试剂及布鲁氏菌抗体凝胶检测方法。
背景技术
布鲁氏菌病(Brucellosis,简称布病)是由布鲁氏菌侵入机体,引起发热和流产为特征的人畜共患的传染性疾病,严重地威胁着人和多种动物的生命健康。布鲁氏菌主要侵害动物的生殖系统,引起流产和不孕不育,带来严重的经济损失。人们通过接触患病动物的血液、胎盘、胚胎或者子宫分泌物,或者人们食用带有布鲁氏菌病菌动物的制品而感染布鲁氏菌病后,往往难以治愈,严重者甚至丧失劳动和生育能力,从而造成严重的公共卫生问题。
目前诊断布鲁氏菌病的检测方法主要包括:虎红平板(RB)凝集法、标准凝集试管(SAT)法、间接抗人球法(Indirect Coombs)以及免疫捕捉凝集(Immunocapture-agglutination)法。这些诊断布鲁氏菌病的检测方法均为血清免疫学方法,需从待测血样中分离出红细胞。其中,虎红平板(RB)法和标准凝集试管(SAT)法只能检出完全抗体,检不出不完全抗体,假阴性机率高(敏感性低);间接抗人球法可以检出不完全抗体,但是需要多次离心洗涤,检测时间长;免疫捕捉法所用试剂价格较贵,另外检测时间需要18到24小时,难以达到快速确诊的需求。
因此,针对上述布鲁氏菌病检测方法的不足,亟需开发一种高敏感性和特异性好、操作便捷快速的布鲁氏菌检测技术。
发明内容
针对现有技术中存在的技术问题,本发明提供的布鲁氏菌抗体凝胶检测试剂具有特异性好、高灵敏度,提供的布鲁氏菌抗体凝胶检测方法操作便捷、快速准确,待测血样可以是血清、全血。
为解决上述技术问题,本发明的技术方案如下:
本发明提供的布鲁氏菌抗体凝胶检测试剂,包括:微球凝胶、凝胶缓冲液、抗人球蛋白试剂、布鲁氏菌抗原试剂,其特征在于:所述凝胶缓冲液以PBS缓冲液为基底,所述PBS缓冲液中加有EDTA二钠、牛血清蛋白、PVP。
优选的,所述微球凝胶为交联葡聚糖微球凝胶,所述交联葡聚糖微球凝胶的粒径范围为30~80微米。
优选的,所述PBS缓冲液含有磷酸氢二钠、磷酸二氢钾、氯化钠和氯化钾,其中,磷酸氢二钠的浓度范围是9~10.5mM,磷酸二氢钾的浓度范围是1.5~2.5mM,氯化钾的浓度范围是2~3mM,氯化钠的浓度范围是130~140mM,所述PBS缓冲液的PH值范围为:7.2~7.4。
优选的,所述PVP的分子量为8000~40000。
优选的,所述凝胶缓冲液是每100ml所述PBS缓冲液中加有0.5~1.5克牛血清蛋白、1.5~3克EDTA二钠,0.2~0.5g PVP,所述凝胶缓冲液的PH值为6.8~7.2。
优选的,所述凝胶缓冲液是每100ml所述PBS缓冲液中含有1~1.5克牛血清蛋白、2~3克EDTA二钠、0.2~0.4克PVP,所述凝胶缓冲液的PH值为7.0。
优选的,所述凝胶缓冲液与所述抗人球蛋白试剂的体积比为1:1~7:1。
优选的,所述布鲁氏菌抗原试剂是PBS缓冲液中加有虎红染色的布鲁氏菌抗原,所述虎红染色的布鲁氏菌抗原的浓度为1%~4%。
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