[发明专利]一种鉴定二十二碳五烯酸的方法

权利要求书

1.一种鉴定二十二碳五烯酸的方法，其特征在于，包括将非极性溶剂提取的活性成分通过高效液相色谱分离非极性相中的物质，然后将经过高效液相色谱分离的物质再进行LC-MS/MS分析；

所述高效液相色谱的流动相：流动相A包括乙腈、甲醇和水，流动相B包括乙腈和异丙醇。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述流动相A中乙腈、甲醇和水占总体积比例分别为(30％-35％)、(33％-36％)和(35-40％)；流动相B中乙腈和异丙醇的体积比例分别为(45％-55％)、(45％-55％)；

优选地，所述流动相A中还包括10mM甲酸铵。

3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述非极性溶剂包括二氯甲烷。

4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述高效液相色谱的洗脱方式为：梯度洗脱；

所述梯度洗脱程序为：

0-1min：流动相A为85％，流动相B为15％；

1-5min：流动相A从85％变化为50％，流动相B从15％变化为50％；

5-15min：流动相A从50％变化为5％，流动相B从50％变化为95％；

15-20min：流动相A为5％，流动相B为95％。

5.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述高效液相色谱的色谱柱为十八烷基键合多孔硅胶。

6.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述高效液相色谱中待测样品的流速为0.5-1.5mL/min。

7.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述高效液相色谱的色谱柱温为：20-30℃。

8.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述高效液相色谱的检测波长为210-220nm。

9.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述LC-MS/MS分析中液相色谱的条件为：

色谱柱：十八烷基键合多孔硅胶；

流动相：流动相A为含有10mM甲酸铵的乙腈、甲醇和水混合溶液；流动相B为乙腈和异丙醇的混合溶液；流动相A中乙腈、甲醇和水的体积比例分别为(30％-35％)、(33％-36％)和(35-40％)；流动相B中乙腈和异丙醇的体积比例分别(45％-55％)、(45％-55％)；

洗脱方式为：梯度洗脱；

所述梯度洗脱程序为：

0-1min：流动相A为80％，流动相B为20％；

1-4min：流动相A从80％变化为40％，流动相B从20％变化为60％；

4-10min：流动相A从40％变化为30％，流动相B从60％变化为70％；

10-15min：流动相A从30％变化为5％，流动相B从70％变化为95％；

15-20min：流动相A为5％，流动相B为95％。

10.根据权利要求9所述的方法，其特征在于，所述LC-MS/MS分析中质谱的检测条件为：

扫描模式为负离子；雾化气压力50-60psi；气帘气压力30-40psi；辅助加热气压50-60psi；离子源温度550-650℃；离子源喷射电压4000-5000V；MS1扫描的质量范围为200-1300Da；去簇电压为-80eV；碰撞能为-10eV；持续时间为200ms；MS2扫描的质量范围为50-1250Da；去簇电压为-80eV；碰撞能为-40eV；持续时间为65ms。