[发明专利]一种血液高丰度蛋白免疫亲和柱的再生方法在审
| 申请号: | 202211528661.2 | 申请日: | 2022-11-30 |
| 公开(公告)号: | CN116271982A | 公开(公告)日: | 2023-06-23 |
| 发明(设计)人: | 高俊顺;高俊莉;江南;王洪;宋林珍;凌欢君 | 申请(专利权)人: | 杭州广科安德生物科技有限公司 |
| 主分类号: | B01D15/42 | 分类号: | B01D15/42;B01D15/38;C07K1/22 |
| 代理公司: | 杭州天昊专利代理事务所(特殊普通合伙) 33283 | 代理人: | 向庆宁;曹小燕 |
| 地址: | 311200 浙江省杭州市萧山区萧*** | 国省代码: | 浙江;33 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 一种 血液 高丰度 蛋白 免疫 亲和 再生 方法 | ||
1.一种血液高丰度蛋白免疫亲和柱的再生方法,其特征在于,先采用含有尿素的甘氨酸-盐酸溶液洗脱,再采用含有氯化钠的甘氨酸-盐酸溶液进行洗脱。
2.如权利要求1所述的方法,其特征在于,先采用含有尿素的甘氨酸-盐酸溶液洗脱3次,再采用含有氯化钠的甘氨酸-盐酸溶液洗脱3次。
3.如权利要求2所述的方法,其特征在于,所述含有尿素的甘氨酸-盐酸溶液,甘氨酸的浓度为0.1-1.0M,尿素的浓度为0.5-4.0M,pH为2.0-3.5。
4.如权利要求3所述的方法,其特征在于,所述含有氯化钠的甘氨酸-盐酸溶液,甘氨酸的浓度为0.1-1.0M,氯化钠的浓度为10-1000mM,pH为2.0-3.0。
5.如权利要求4所述的方法,其特征在于,含有尿素的甘氨酸-盐酸溶液的加入体积为柱容量的60~90%,含有氯化钠的甘氨酸-盐酸溶液的加入体积为柱容量的60~90%。
6.如权利要求5所述的方法,其特征在于,包括以下步骤:
(1)先采用含有尿素的甘氨酸-盐酸溶液洗脱3次,再采用含有氯化钠的甘氨酸-盐酸溶液洗脱3次;
(2)弃去洗脱液,加入中和溶液调节pH至中性,所述中和溶液为Tris-HCl溶液;
(3)弃去中和溶液,加入平衡溶液;
(4)弃去平衡溶液,加入保存溶液。
7.如权利要求6所述的方法,其特征在于,步骤(2)所述Tris-HCl溶液浓度为0.1-1.0M,pH为7.5-8.5;加入中和溶液后,可弃去,再重新加入中和溶液,重复2次。
8.如权利要求7所述的方法,其特征在于,步骤(3)所述平衡溶液为PBS溶液,浓度为5-50mM,pH为7.0-8.0;加入平衡溶液后,可弃去,再重新加入平衡溶液,重复2次。
9.如权利要求8所述的方法,其特征在于,步骤(4)所述保存溶液为含有Proclin300的PBS溶液,其中PBS的浓度为5-50mM,Proclin300的体积百分含量为0.01-0.05%,pH为7.0-8.0。
10.一组洗脱液用于制备使血液高丰度蛋白免疫亲和柱再生的试剂的用途,其特征在于,所述洗脱液包括含有尿素的甘氨酸-盐酸溶液和含有氯化钠的甘氨酸-盐酸溶液。
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