[发明专利]一种用于培养MDCK细胞及扩增病毒的组合培养基及其应用

权利要求书

1.一种用于扩增病毒的组合培养基，其特征在于，由下列构成：

用于贴壁培养MDCK细胞的培养基；和

病毒维持液；

其中，所述用于贴壁培养MDCK细胞的培养基的组成为：

MEM培养基；

3~5体积%的血清；和

添加剂，所述添加剂的组成为：

终浓度为65.2mg/L的L-丙氨酸；终浓度为55.384mg/L的L-盐酸精氨酸；终浓度为11.08mg/L的L-天门冬氨酸；终浓度为27.04mg/L的L-门冬酰胺；终浓度为13mg/L的L-半胱氨酸盐酸盐一水合物；终浓度为20mg/L的L-胱氨酸二盐酸盐；终浓度为75.944mg/L的L-谷氨酸；终浓度为105.784mg/L的L-谷氨酰胺；终浓度为36.928mg/L的甘氨酸；终浓度为5.704mg/L的L-盐酸组氨酸一水合物；终浓度为22.4mg/L的L-羟脯氨酸；终浓度为15.92mg/L的L-异亮氨酸；终浓度为20.4mg/L的L-亮氨酸；终浓度为21.472mg/L的L-盐酸赖氨酸；终浓度为12.944mg/L的L-甲硫氨酸；终浓度为7.872mg/L的L-苯丙氨酸；终浓度为40.424mg/L的L-脯氨酸；终浓度为39.184mg/L的L-丝氨酸；终浓度为6.224mg/L的L-苏氨酸；终浓度为4.144mg/L的L-色氨酸；终浓度为14.44mg/L的L-缬氨酸；终浓度为695.2mg/L的丙氨酰谷氨酰胺；终浓度为83mg/L的丙酮酸钠；终浓度为960mg/L的HEPES；终浓度为640mg/L的大豆水解物；终浓度为640mg/L的酵母水解物；终浓度为196.4mg/L的无水磷酸氢二钠；终浓度为1590.384mg/L的D-无水葡萄糖；终浓度为0.208mg/L的还原型谷胱甘肽；终浓度为0.248mg/L的七水硫酸亚铁；终浓度为0.272mg/L的七水硫酸锌；终浓度为1.2mg/L的维生素C；终浓度为13.32mg/L的氯化胆碱；终浓度为0.504mg/L的D-泛酸钙；终浓度为0.46mg/L的叶酸；终浓度为13.4424mg/L的肌醇；终浓度为0.02mg/L的九水硝酸铁；终浓度为0.5mg/L的氯化锂；终浓度为2.2mg/L的柠檬酸；终浓度为4mg/L的牛磺酸；终浓度为0.8mg/L的重组人胰岛素；终浓度为4mg/L的柠檬酸铁；终浓度为0.96mg/L的乙醇胺；终浓度为0.84mg/L的EDTA；终浓度为1.112mg/L的烟酰胺；终浓度为1.0344mg/L的维生素B6；终浓度为0.328mg/L的维生素B1；终浓度为2.552mg/L的维生素B12；终浓度为6.4mg/L的无水L-酪氨酸二钠盐；终浓度为0.00104mg/L的五水硫酸铜；终浓度为33.52mg/L的六水氯化镁；终浓度为0.072mg/L的D-生物素；终浓度为1.432mg/L的次黄嘌呤；终浓度为0.0496mg/L的亚油酸；终浓度为0.168mg/L的硫辛酸；终浓度为0.048mg/L的1，4-丁二胺二盐酸盐；终浓度为0.104mg/L的维生素B2；终浓度为0.312mg/L的胸苷；终浓度为0.208mg/L的对氨基苯甲酸；终浓度为0.00016006mg/L的氯化铝；终浓度为0.000460172mg/L的乙酸钡；终浓度为0.000200075mg/L的六水氯化钴；终浓度为1.6006 X 10^-5mg/L的四水氯化锰；终浓度为0.000600224mg/L的氟化钠；终浓度为0.000140052mg/L的氯化亚锡；终浓度为0.000140052mg/L的氯化镉；终浓度为6.00224 X10^-5mg/L的二氧化锗；终浓度为0.004mg/L的亚硒酸钠；终浓度为0.000800299mg/L的九水偏硅酸钠；终浓度为2.00075 X 10^-5 mg/L的氯化镍；终浓度为4.00149 X 10^-5 mg/L的偏钒酸铵；终浓度为5.00 X 10^-6 mg/L的溴化钾；终浓度为1.6006 X 10^-5 mg/L的碘化钾；终浓度为8.00 X 10^-7mg/L的氯化铷；终浓度为1.00037 X 10^-5mg/L的钼酸铵；终浓度为6.00 X 10^-7mg/L的硝酸银；终浓度为0.06mg/L的腺嘌呤；终浓度为0.02mg/L的盐酸鸟嘌呤；终浓度为0.01mg/L的维生素D2；终浓度为0.1328mg/L的维生素E；终浓度为0.016mg/L的维生素A醋酸酯；终浓度为0.0024mg/L的5-氨基-4-甲酰胺咪唑；终浓度为0.004mg/L的烟酸；终浓度为0.06mg/L的2D-脱氧核糖；终浓度为0.0008mg/L的氢化可的松；终浓度为0.016184561mg/L的肉豆蔻酸；终浓度为0.016184561mg/L的油酸；终浓度为0.016184561mg/L的棕榈酸；终浓度为0.016184561mg/L的硬脂酸；终浓度为0.0048mg/L的EGF；终浓度为0.0024mg/L的IGF；

所述病毒维持液包括：所述用于贴壁培养MDCK细胞的培养基且不含有大豆水解物、酵母水解物、EGF和IGF。