[发明专利]一种过敏原特异性IgE抗体检测试剂盒及其制备方法

说明书

本申请涉及一种过敏原特异性IgE抗体检测试剂盒及其制备方法，涉及医疗器械的技术领域，所述试剂盒包括磁微粒试剂、标记的鼠抗人IgE抗体试剂、酶结合物试剂、发光底物液、质控品、校准品以及清洗液；所述磁微粒试剂含有包被有多聚过敏原的磁微粒，所述标记的鼠抗人IgE抗体试剂含有标记的鼠抗人IgE抗体，所述发光底物液包括底物A液和底物B液。本申请制备的试剂盒可在检测时有效提高过敏原特异性IgE抗体检测灵敏度，且有效降低了检测时杂蛋白的干扰。

技术领域

本申请涉及医疗器械的技术领域，尤其是涉及一种过敏原特异性IgE抗体检测试剂盒及其制备方法。

背景技术

过敏原特异性IgE抗体检测试剂盒是用于检测过敏原特异性IgE抗体的，通过检测过敏原特异性IgE抗体可作为Ⅰ型变态反应中最常用的辅助诊断方法。

随着科学技术的不断发展，目前，市面上的过敏原特异性IgE抗体检测试剂盒较为常见的一种检测方法为磁微粒化学发光免疫分析法，它是将磁性分离技术、化学发光技术和免疫分析技术三者结合起来的一种新兴分析方法，该分析方法充分利用了磁性分离技术的快速易自动性和免疫分析的特异性，因而在生物医学分析上已展现出不可替代的作用。

目前，现有的传统检测体系通过采用生物素标记过敏原、链霉亲和素包被的磁微粒与待测样本一起进行反应，利用生物素标记的过敏原去捕获待测样本中的过敏原特异性IgE抗体，反应结束后，经过磁分离和清洗，然后加入酶标记鼠抗人IgE抗体，从而使得酶标记鼠抗人IgE抗体与过敏原特异性IgE抗体进行结合；再然后，通过利用发光底物液可进行显色或发光，进而通过显色结果或发光强度来判断待测样本中的过敏原特异性IgE抗体的含量，从而医生可根据检测结果辅助病情的诊断和判定。

针对上述中的相关技术，用于标记鼠抗人IgE抗体的标记物主要有：辣根过氧化物酶、碱性磷酸酶等，当酶标记鼠抗人IgE抗体在与待测样本中的过敏原特异性IgE抗体结合时，两者的结合率偏低，从而会使得检测的灵敏度较低，可能会导致检测结果不准确的情况的出现。

发明内容

为了提高过敏原特异性IgE抗体检测的灵敏度，本申请提供一种过敏原特异性IgE抗体检测试剂盒及其制备方法。

本申请提供的一种过敏原特异性IgE抗体检测试剂盒，采用如下的技术方案：

一种过敏原特异性IgE抗体检测试剂盒：所述试剂盒包括磁微粒试剂、标记的鼠抗人IgE抗体试剂、酶结合物试剂、发光底物液、质控品、校准品以及清洗液；所述磁微粒试剂含有包被有多聚过敏原的磁微粒，所述标记的鼠抗人IgE抗体试剂含有标记的鼠抗人IgE抗体，所述发光底物液包括底物A液和底物B液。

优选的，所述标记的鼠抗人IgE抗体为标记的被亲水聚合物修饰的鼠抗人IgE抗体；所述亲水聚合物为聚乙烯亚胺、九聚精氨酸中的一种。

优选的，所述标记的被亲水聚合物修饰的鼠抗人IgE抗体的标记物为生物素，且所述酶结合物试剂为辣根过氧化物酶标记的亲和素试剂；或所述标记的被亲水聚合物修饰的鼠抗人IgE抗体的标记物为异硫氰酸荧光素，且所述酶结合物试剂为辣根过氧化物酶标记的异硫氰酸荧光素抗体试剂。

优选的，所述包被有多聚过敏原的磁微粒为包被有多聚过敏原的甲苯磺酰基磁微粒。

本申请提供的一种过敏原特异性IgE抗体检测试剂盒的制备方法，包括如下步骤：

S1、磁微粒试剂的制备

S11、将过敏原加入到离心管中，并使用0.1mol/L包被缓冲液进行稀释；将Pierce™ Traut试剂使用0.1mol/L包被缓冲液进行溶解，并涡旋混匀；将溶解混匀的Pierce™Traut试剂与稀释后的过敏原一起混合均匀，并在室温条件下反应0.5小时，反应结束后，即得到多聚过敏原；将多聚过敏原进行超滤，超滤结束后，即得到经过纯化的多聚过敏原；