[发明专利]一种加工型辣椒不易出胚基因型花药培养获得胚状体的培养方法

说明书

本发明公开了一种加工型辣椒不易出胚基因型花药培养获得胚状体的培养方法，涉及生物技术领域。该培养方法包括将加工型辣椒不易出胚基因型与加工型辣椒花培DH系杂交，获得杂交一代，再将所述杂交一代的花药进行花药培养的步骤。本发明以加工型辣椒花培DH系作为桥梁，与加工型辣椒不易出胚基因型进行杂交，以其杂交一代为花药培养的供体亲本，可以明显地提高加工型辣椒不易出胚基因型花药培养的出胚率。本发明提供的加工型辣椒不易出胚基因型花药培养获得胚状体的培养方法，步骤实用、效率高，特别适合加工型辣椒细胞工程领域方面的应用。

技术领域

本发明涉及生物技术领域，特别是涉及一种加工型辣椒不易出胚基因型花药培养获得胚状体的培养方法。

背景技术

辣椒(Capsicum annuum L.)是世界上一种重要的经济作物，可作为蔬菜、香料、食用色素和医药用途。2020年全球用于干制的辣椒种植面积已达161.5万公顷，产量达415.7万吨(http://www.fao.org/faostat/zh/#data/QC)。目前，便利的交通和经济的迅猛发展，加速了全球人口流动，导致嗜辣地区和人群越来越多。随着辣椒育种工作的深入开展，自然资源中辣椒种质已显现出匮乏和急剧衰退的趋势。因此，加快种质资源的创新效率是当前加工型辣椒育种工作者面临的亟待解决的问题。

花药培养能从细胞水平上快速创制单倍体植株，单倍体能在植株上较充分地呈现重组的配子类型，创制出新基因型植株，经秋水仙素加倍后可获得双单倍体纯系(DoubledHaploid,DH)。因此，通过花药培养可获得性状优良的、符合育种目标的DH系，根据育种目标进入常规育种程序，可直接作为育种的中间材料或亲本之一育成杂交品种。花药培养与南繁结合可以在1-2年内快速获得DH系，较传统方法缩短3-4年的时间，显著提高育种的效率。

有关辣椒花药培养的大量研究表明，供体植株的基因型对花药培养胚状体诱导的影响极为重要，不仅影响胚状体诱导率，而且也影响胚状体质量和成苗率(戈伟等,江苏农业科学,2011,39(5):27-28、张芳等,西北农业学报,2009,18(5):341-345、李健欣等,植物生理学通讯,2009,45(8):794-796)。申请号为200610042616.0的中国发明专利申请中公开了一种辣椒小孢子诱导获得胚状体的培养方法，主要涉及实行液固双层培养系统，采用麦芽糖作为碳源，低温处理，连续黑暗培养，以此方法提高胚状体的诱导效率。加工型辣椒花药培养近年来也取得了一定的成就，李怡斐等(分子植物育种,2020,18(19):6467-6473)、李怡斐等(分子植物育种，2017,15(06):2317-2321)、李怡斐等(中国园艺学会2018年学术年会会议论文集)通过辣椒花药培养创制了一些优异的DH系。但是由于加工型辣椒花药培养胚状体诱导率低，对不易出胚基因型效果更不理想，这极大地限制了加工型辣椒花药培养技术在育种上的应用。因此，寻找一种提高加工型辣椒不易出胚基因型花药培养获得胚状体的培养方法具有重要的意义。

发明内容

本发明的目的是提供一种加工型辣椒不易出胚基因型花药培养获得胚状体的培养方法，以解决上述现有技术存在的问题，本发明提供的培养方法可以有效提高加工型辣椒不易出胚基因型花药培养的出胚率。

为实现上述目的，本发明提供了如下方案：

本发明提供一种加工型辣椒不易出胚基因型花药培养获得胚状体的培养方法，包括将加工型辣椒不易出胚基因型与加工型辣椒花培DH系杂交，获得杂交一代，再将所述杂交一代的花药进行花药培养的步骤。

进一步地，所述辣椒花培DH系为渝辣选7-1或渝辣选3-2。

进一步地，所述杂交一代的花药进行花药培养的步骤包括：将所述花药接种于1^#培养基或2^#培养基进行培养；