[发明专利]一种检测PD-L1的质控品及其制备方法和应用

说明书

本发明公开了一种检测PD‑L1的质控品及其制备方法和应用。所述质控品包括PD‑L1蛋白‑脂质囊泡复合物的切片，所述PD‑L1蛋白‑脂质囊泡复合物包括脂质囊泡和修饰于脂质囊泡上的PD‑L1蛋白，所述PD‑L1蛋白‑脂质囊泡复合物的切片包括免疫组织化学染色强度分别为0、1+、2+和3+的切片，所述PD‑L1蛋白‑脂质囊泡复合物的切片还包括免疫组织化学染色比例分别为1%、1%~5%、5%~10%和10%的切片。通过在脂质囊泡上修饰PD‑L1蛋白，制备不同免疫组织化学染色强度和染色比例的脂质囊泡，作为PD‑L1免疫组织化学染色的质控品，提供全面精准的质控和判读指导。

技术领域

本发明属于生物技术领域，涉及一种检测PD-L1的质控品及其制备方法和应用。

背景技术

程序性死亡配体-1(Programmed death-ligand 1，PD-L1)是大小为40KDa的第一型跨膜蛋白，属于B7家族的成员。PD-1/PD-L1信号通路是参与肿瘤免疫逃逸的重要途径，当肿瘤发生时，其细胞上高表达的PD-L1与T细胞表面的PD-1结合，下调或抑制T细胞功能，阻止机体免疫T细胞攻击肿瘤细胞，导致肿瘤细胞免疫逃逸。PD-L1在多种肿瘤细胞中均有上调表达，如三阴性乳腺癌、非小细胞肺癌、胃癌和胃食管结合部癌、尿路上皮癌、食道癌、头颈部鳞癌、宫颈癌、胰腺癌和黑色素瘤等。免疫治疗是通过PD-1或PD-L1单抗阻断T细胞上的PD-1与肿瘤细胞上的PD-L1结合，使T细胞识别并攻击肿瘤细胞，最终起到治疗恶性肿瘤的作用。免疫治疗显著改善了癌症的治疗效果，但是这一疗法只对一部分肿瘤患者（PD-L1阳性的患者）有作用，因此在进行临床研究乃至临床治疗时，都需要确定备选患者组织中PD-L1抗原的表达情况，如利用伴随诊断试剂针对特定的治疗靶点进行检测，提供治疗反应的信息，有助于确定能够从某一治疗产品中获益的患者群体，从而改善治疗预后并降低开支。

目前，临床PD-L1的检测中，主要存在以下问题：

（1）目前市面上主要包括AutoStainer Link 48平台、Ventana Benchmark Ultra平台和Leica Bond Max/III平台，不同平台采用的二抗系统不同，单个抗体在每个平台上的染色差异显著，市面上的伴随诊断产品大多为了避免染色差异，而不对染色强弱进行判读；

（2）不同的抗体检测结果判读标准不同，目前用于伴随诊断的PD-L1检测抗体使用的判读方法主要有TC、CPS以及分别计算TC和IC判读方法，不同的肿瘤中判读方法不同，针对非小细胞肺癌，28-8和22C3抗体使用TC的判读方法，但SP142抗体采用的是TC和IC联合判读，FDA批准22C3抗体的说明书中指出针对非小细胞肺癌使用TC的判读方法，但针对胃腺癌和胃食管结合部腺癌，则建议使用CPS的判读方法，同样在宫颈癌和尿路上皮癌中亦推荐使用CPS判读方法，因此PD-L1的判读需要专业的病理医生经过大量的训练才能保证判读的准确性，较难推广应用。

基于上述问题，各检测机构、试剂和仪器生产商均采用自制的质控片对每轮检测进行质控，这些质控片的质量良莠不齐，且往往组成单一，仅能给检测做定性参考，而PD-L1的检测对结果的精准度要求是相当高的，目前上市的PD-L1伴随诊断产品的Cut off值均为低值，检测中些许偏差就可能导致错误的用药指导，给病人造成严重的后果。

综上所述，提供一种检测PD-L1的质控片，能够保证对抗体的染色进行质控，以及对精准判读提供指导，对于癌症诊断及治疗具有重要意义。

发明内容

针对现有技术的不足和实际需求，本发明提供一种检测PD-L1的质控品及其制备方法和应用，通过在脂质囊泡上修饰PD-L1蛋白，获得PD-L1蛋白-脂质囊泡复合物，制备不同染色强度和染色比例的脂质囊泡，作为PD-L1免疫组织化学染色的质控品，提供全面精准的质控和判读指导。

为达上述目的，本发明采用以下技术方案：