[发明专利]一种用于提取物证检材上DNA的滤膜及其方法在审
申请号: | 202211464652.1 | 申请日: | 2022-11-22 |
公开(公告)号: | CN115820623A | 公开(公告)日: | 2023-03-21 |
发明(设计)人: | 刘超;蔡鸣;翟滇;李安;鄢荣;杜蔚安;陈雪云;郑阳阳;韩亮;曾旭阳 | 申请(专利权)人: | 珠海市祥臻生物科技有限公司;广州市刑事科学技术研究所 |
主分类号: | C12N15/10 | 分类号: | C12N15/10 |
代理公司: | 广州三环专利商标代理有限公司 44202 | 代理人: | 谢晓华 |
地址: | 519000 广东省珠海市高新区*** | 国省代码: | 广东;44 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 用于 提取 物证 检材上 dna 滤膜 及其 方法 | ||
本发明公开一种用于提取物证检材上DNA的滤膜及其方法,包括以下步骤:S1:用第一磁珠悬浮液对滤膜进行浸泡,对浸泡有滤膜的第一磁珠悬浮液进行抽滤,直至滤膜上的液体被抽干,得到吸附有磁珠的滤膜;S2:利用缓冲液和第二磁珠悬浮液的混合液对物证检材表面上进行冲脱处理后,获得富集液,利用吸附有磁珠的滤膜对富集液进行抽滤,直至滤膜上富集液被抽干,得到富集有DNA和/或机体细胞的滤膜;S3:对富集有DNA和/或机体细胞的滤膜提取DNA。本发明解决了现有的提取方法无法准确提取体积大、耐水性好、异形、脱落细胞少且分布散的物证检材上的DNA,从而实现针对多类型、多形态、不规则物证检材上微量DNA准确提取的目的。
技术领域
本发明涉及DNA采集检测技术领域,具体涉及一种用于提取物证检材上DNA的滤膜及其方法。
背景技术
随着DNA检测技术的飞速发展,其在打击量大、面广且多发、易发的盗窃犯罪中,发挥着越来越重要的作用,成为了一个新的破案增长点。在许多区县级公安机关,通过DNA认定犯罪嫌疑人的数量已经超过指纹认定的数量,盗窃案件提取的生物检材数量也远远超过凶杀、伤害、强奸等人身伤亡案件提取的生物检材数量之和。由于盗窃案件提取的生物检材多为接触类脱落细胞,DNA检出率较低,容易发生污染,因此勘查人员能否在现场的物证检材中提取到高质量的DNA,是决定DNA检出认定能力的基础。物证检材的类型、发现提取部位和提取转移方法等都是影响DNA检验结果的重要因素。
目前在DNA采集检测技术领域中,针对不同物证检材上留存的微量DNA进行提取的方式,主要有擦拭、粘取、剪切、刮取、负压吸附以及震荡冲洗等。但是在DNA提取的实际工作中,针对一部分体积大、耐水性好或外表形状为异形等的物证,仅采用常规的擦拭、粘取或者刮取等转移性的提取方法,难以获得准确的DNA检验结果。
另外,犯罪嫌疑人遗留在犯罪现场的帽子、口罩、衣服、手套、运动鞋以及袜子,因其含有机体的脱落细胞以及游离DNA,逐渐成为常规物证检材。但是这类物证检材因为含有的脱落细胞和游离DNA少,并且分布较散,给DNA的提取带来了一定的困难。
发明内容
为了克服现有技术的不足,本发明提供一种用于提取物证检材上DNA的滤膜及其方法,解决现有的DNA提取方法无法准确提取体积大、耐水性好、异形、脱落细胞和游离DNA少且分布散的物证检材上的DNA,从而实现针对多类型、多形态、不规则物证检材上微量DNA准确提取的目的。
为解决上述问题,本发明所采用的技术方案如下:
一种用于提取物证检材上DNA的滤膜,所述滤膜的孔径为0.45-1.5um,且表面附着有粒径为1-3um的磁珠颗粒。
一种用于提取物证检材上DNA的方法,包括以下步骤:
步骤S1:用第一磁珠悬浮液对滤膜进行浸泡,对浸泡有滤膜的第一磁珠悬浮液进行抽滤,直至滤膜上液体被抽干,得到吸附有磁珠的滤膜;
步骤S2:利用缓冲液和第二磁珠悬浮液的混合液对物证检材表面上的DNA和/或机体细胞进行冲脱处理后,获得富集液,利用吸附有磁珠的滤膜对所述富集液进行抽滤,直至滤膜上的富集液被抽干,得到富集有DNA和/或机体细胞的滤膜;
步骤S3:对所述富集有DNA和/或机体细胞的滤膜进行DNA提取。
作为本发明优选的实施方式,所述第一磁珠悬浮液为硅微粉、聚丙烯酸钠以及纯水的混合物;所述第二磁珠悬浮液为混合粉末溶液、硅微粉以及纯水的混合物;
其中,所述混合粉末溶液为将乙二胺四乙酸、氯化钠、胍盐以及乙酸钠加入异丙醇溶液混合均匀而制成。
作为本发明优选的实施方式,所述步骤S1中的浸泡具体为:用第一磁珠悬浮液对滤膜浸泡1-10min。
作为本发明优选的实施方式,按质量比计,所述混合液中缓冲液与第二磁珠悬浮液的比例为10~20:1。
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