[发明专利]一种用于提取物证检材上DNA的滤膜及其方法在审
申请号: | 202211464652.1 | 申请日: | 2022-11-22 |
公开(公告)号: | CN115820623A | 公开(公告)日: | 2023-03-21 |
发明(设计)人: | 刘超;蔡鸣;翟滇;李安;鄢荣;杜蔚安;陈雪云;郑阳阳;韩亮;曾旭阳 | 申请(专利权)人: | 珠海市祥臻生物科技有限公司;广州市刑事科学技术研究所 |
主分类号: | C12N15/10 | 分类号: | C12N15/10 |
代理公司: | 广州三环专利商标代理有限公司 44202 | 代理人: | 谢晓华 |
地址: | 519000 广东省珠海市高新区*** | 国省代码: | 广东;44 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 用于 提取 物证 检材上 dna 滤膜 及其 方法 | ||
1.一种用于提取物证检材上DNA的滤膜,其特征在于,所述滤膜的孔径为0.45-1.5um,且表面附着有粒径为1-3um的磁珠颗粒。
2.一种用于提取物证检材上DNA的方法,其特征在于,包括以下步骤:
步骤S1:用第一磁珠悬浮液对滤膜进行浸泡,对浸泡有滤膜的第一磁珠悬浮液进行抽滤,直至滤膜上的液体被抽干,得到吸附有磁珠的滤膜;
步骤S2:利用缓冲液和第二磁珠悬浮液的混合液对物证检材表面上的DNA和/或机体细胞进行冲脱处理后,获得富集液,利用吸附有磁珠的滤膜对所述富集液进行抽滤,直至滤膜上的富集液被抽干,得到富集有DNA和/或机体细胞的滤膜;
步骤S3:对所述富集有DNA和/或机体细胞的滤膜进行DNA提取。
3.根据权利要求2所述的用于提取物证检材上DNA的方法,其特征在于,所述第一磁珠悬浮液为硅微粉、聚丙烯酸钠以及纯水的混合物;所述第二磁珠悬浮液为混合粉末溶液、硅微粉以及纯水的混合物;
其中,所述混合粉末溶液为将乙二胺四乙酸、氯化钠、胍盐以及乙酸钠加入异丙醇溶液混合均匀而制成。
4.根据权利要求3所述的用于提取物证检材上DNA的方法,其特征在于,所述步骤S1中的浸泡具体为:用第一磁珠悬浮液对滤膜浸泡1-10min。
5.根据权利要求3所述的用于提取物证检材上DNA的方法,其特征在于,按质量比计,所述混合液中缓冲液与第二磁珠悬浮液的比例为10~20:1。
6.根据权利要求2所述的用于提取物证检材上DNA的方法,其特征在于,所述滤膜的孔径为0.45-1.5um。
7.根据权利要求2所述的用于提取物证检材上DNA的方法,其特征在于,所述步骤S1和步骤S2中的抽滤具体为:真空负压抽滤,真空负压值为-60Kpa至-95Kpa。
8.根据权利要求2所述的用于提取物证检材上DNA的方法,其特征在于,所述冲脱处理具体为:对物证检材表面进行冲淋和/或定位浸泡部分或全部的物证检材表面。
9.根据权利要求5所述的用于提取物证检材上DNA的方法,其特征在于,所述缓冲液的制备具体为:将乙二胺四乙酸、氯化钠、高氯酸盐以及乙酸钠加入异丙醇溶液,混合均匀后,再利用乙酸将PH值至6-7;
其中,按质量百分比计,所述异丙醇溶液的浓度为10%-30%,按毫摩尔每升计,所述乙二胺四乙酸的含量为1-100,所述氯化钠的含量为0.5-1,所述高氯酸盐的含量为0.5-2,所述乙酸钠的含量为100-200。
10.根据权利要求5所述的用于提取物证检材上DNA的方法,其特征在于,所述缓冲液的制备具体为:将乙二胺四乙酸、氯化钠、胍盐以及乙酸钠加入异丙醇溶液,混合均匀后,再利用乙酸将PH值调整至6-7;
其中,按质量百分比计,所述异丙醇溶液的浓度为10%-30%,按毫摩尔每升计,所述乙二胺四乙酸的含量为1-100,所述氯化钠的含量为0.5-1,所述胍盐的含量为0.5-2L,所述乙酸钠的含量为100-200。
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