[发明专利]一种利用分型纳米纤维培养三维细胞球体的方法在审
申请号: | 202211457761.0 | 申请日: | 2022-11-21 |
公开(公告)号: | CN115717123A | 公开(公告)日: | 2023-02-28 |
发明(设计)人: | 费翔;朱美芳;刘红梅;王雪芬 | 申请(专利权)人: | 东华大学 |
主分类号: | C12N5/0775 | 分类号: | C12N5/0775 |
代理公司: | 北京和联顺知识产权代理有限公司 11621 | 代理人: | 夏伟恒 |
地址: | 201620 上*** | 国省代码: | 上海;31 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 利用 纳米 纤维 培养 三维 细胞 球体 方法 | ||
1.一种利用分型纳米纤维培养三维细胞球体的方法,包括以下步骤:
(1)将PLLA与明胶溶于六氟异丙醇,通过静电纺丝技术制备得到PLLA/明胶纳米纤维基体;
(2)通过液相/气相诱导结晶方法,在步骤(1)所述的PLLA/明胶纳米纤维基体的表面包裹PLLA晶体得到分型纳米纤维;
(3)将细胞培养于步骤(2)所述的分型纳米纤维上得到三维细胞球体。
2.根据权利要求1所述的利用分型纳米纤维培养三维细胞球体的方法,其特征在于,所述步骤(1)中PLLA的含量为50wt%~90wt%,明胶的含量为10wt%~50wt%。
3.根据权利要求1所述的利用分型纳米纤维培养三维细胞球体的方法,其特征在于,所述步骤(1)中静电纺丝技术的纺丝液浓度为6~15wt%,电压为15~25kV,挤出速度为1~3ml/h,喷丝头与接收板间距为12~15cm。
4.根据权利要求1所述的利用分型纳米纤维培养三维细胞球体的方法,其特征在于,所述步骤(2)中液相诱导结晶的方法包括:将PLLA溶于对二甲苯中,加热后得到均一溶液,然后将步骤(1)所述的PLLA/明胶纳米纤维基体浸没于上述得到的均一溶液中,结晶,然后用对二甲苯溶液对上述结晶进行清洗,烘干,得到分型纳米纤维。
5.根据权利要求4所述的利用分型纳米纤维培养三维细胞球体的方法,其特征在于,所述加热的温度为120~140℃,加热的时间为0.5~1.5h。
6.根据权利要求4所述的利用分型纳米纤维培养三维细胞球体的方法,其特征在于,所述结晶的温度为80~85℃,结晶的时间为3~15h。
7.根据权利要求1所述的利用分型纳米纤维培养三维细胞球体的方法,其特征在于,所述PLLA的重均分子量为17-26万。
8.根据权利要求1所述的利用分型纳米纤维培养三维细胞球体的方法,其特征在于,所述细胞为干细胞、体细胞或癌细胞。
9.根据权利要求1所述的利用分型纳米纤维培养三维细胞球体的方法,其特征在于,所述细胞的种植密度为10000~50000细胞/cm2。
10.根据权利要求1所述的利用分型纳米纤维培养三维细胞球体的方法,其特征在于,所述细胞在分型纳米纤维上的培养时间为1~7d。
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