[发明专利]一种利用分型纳米纤维培养三维细胞球体的方法在审

专利信息
申请号: 202211457761.0 申请日: 2022-11-21
公开(公告)号: CN115717123A 公开(公告)日: 2023-02-28
发明(设计)人: 费翔;朱美芳;刘红梅;王雪芬 申请(专利权)人: 东华大学
主分类号: C12N5/0775 分类号: C12N5/0775
代理公司: 北京和联顺知识产权代理有限公司 11621 代理人: 夏伟恒
地址: 201620 上*** 国省代码: 上海;31
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摘要:
搜索关键词: 一种 利用 纳米 纤维 培养 三维 细胞 球体 方法
【权利要求书】:

1.一种利用分型纳米纤维培养三维细胞球体的方法,包括以下步骤:

(1)将PLLA与明胶溶于六氟异丙醇,通过静电纺丝技术制备得到PLLA/明胶纳米纤维基体;

(2)通过液相/气相诱导结晶方法,在步骤(1)所述的PLLA/明胶纳米纤维基体的表面包裹PLLA晶体得到分型纳米纤维;

(3)将细胞培养于步骤(2)所述的分型纳米纤维上得到三维细胞球体。

2.根据权利要求1所述的利用分型纳米纤维培养三维细胞球体的方法,其特征在于,所述步骤(1)中PLLA的含量为50wt%~90wt%,明胶的含量为10wt%~50wt%。

3.根据权利要求1所述的利用分型纳米纤维培养三维细胞球体的方法,其特征在于,所述步骤(1)中静电纺丝技术的纺丝液浓度为6~15wt%,电压为15~25kV,挤出速度为1~3ml/h,喷丝头与接收板间距为12~15cm。

4.根据权利要求1所述的利用分型纳米纤维培养三维细胞球体的方法,其特征在于,所述步骤(2)中液相诱导结晶的方法包括:将PLLA溶于对二甲苯中,加热后得到均一溶液,然后将步骤(1)所述的PLLA/明胶纳米纤维基体浸没于上述得到的均一溶液中,结晶,然后用对二甲苯溶液对上述结晶进行清洗,烘干,得到分型纳米纤维。

5.根据权利要求4所述的利用分型纳米纤维培养三维细胞球体的方法,其特征在于,所述加热的温度为120~140℃,加热的时间为0.5~1.5h。

6.根据权利要求4所述的利用分型纳米纤维培养三维细胞球体的方法,其特征在于,所述结晶的温度为80~85℃,结晶的时间为3~15h。

7.根据权利要求1所述的利用分型纳米纤维培养三维细胞球体的方法,其特征在于,所述PLLA的重均分子量为17-26万。

8.根据权利要求1所述的利用分型纳米纤维培养三维细胞球体的方法,其特征在于,所述细胞为干细胞、体细胞或癌细胞。

9.根据权利要求1所述的利用分型纳米纤维培养三维细胞球体的方法,其特征在于,所述细胞的种植密度为10000~50000细胞/cm2

10.根据权利要求1所述的利用分型纳米纤维培养三维细胞球体的方法,其特征在于,所述细胞在分型纳米纤维上的培养时间为1~7d。

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