[发明专利]一种甘蔗内生真菌提取物及其在制备甘蔗病原菌治疗剂中的应用

说明书

本发明公开了一种甘蔗内生真菌提取物及其在制备甘蔗病原菌治疗剂中的应用。所述的甘蔗内生真菌提取物是从甘蔗内生真菌Fusarium proliferatum15的发酵液中提取获得。本发明研究发现，甘蔗内生真菌提取物对甘蔗黑穗病菌、甘蔗白条病菌、水稻稻瘟菌均具有良好的抑制活性，可应用于甘蔗病原菌、水稻稻瘟菌防治，具有广阔的应用前景。

技术领域

本发明涉及天然产物技术领域，具体涉及一种甘蔗内生真菌提取物及其在制备甘蔗病原菌治疗剂中的应用。

背景技术

甘蔗是我国乃至世界重要的糖料作物和理想的能源植物，甘蔗产业的稳定发展对蔗农增收和国家能源安全保障具有重要意义。然而，在甘蔗生长过程中会遭遇甘蔗黑穗病、白条病、花叶病、宿根艾华病和稍腐病等病害的侵染，不仅甘蔗品质和产量受到严重影响，还缩短宿根年限，甚至造成品种种性退化，甘蔗病害已成为制约我国甘蔗生产的一个重要因素。因此，有效防止甘蔗病原菌的危害是一个极为重要的工作，在生产实践中具有重要的意义。

传统甘蔗病原菌防治技术存在成本高、有效期短、目标针对性差，可能会对环境产生危害等问题，开发新型无公害防治技术具有重要的理论和现实意义。借助分布广泛、资源量大的内生真菌开发相关防止技术，不仅是一种新的尝试，而且原料来源充足，技术路线可行，具备在生产实践中应用的基础。

内生真菌最早由De Bary于1984年提出，最初用来定义生长在植物组织中的任何有机体。近年来，内生菌被定义为一类寄生在植物活体内部组织中且不对寄生植物造成任何直接的、明显的负面影响的微生物。内生真菌与其寄生植物之间的关系可能从潜在的植物病原发生到互惠共生。全球近30万种植物是各种内生真菌的宿主。此外，内生微生物群落的分布与宿主分布不同，因此造就了巨大的生物多样性。而且作为一个稍微开放的特殊生物资源库，内生真菌已被证明是结构新颖、具有生物活性的次生代谢产物的优秀生产者，入生物碱，吡啶类药物，多酚，多肽，吲哚和异香豆素衍生物，然而，对于甘蔗内生真菌发酵提取物是否含有抗甘蔗病原菌的有效成分以及能否将其应用于甘蔗病原菌防治领域等方面的内容，目前未见报道。

发明内容

本发明的目的在于提供一种甘蔗内生真菌提取物及其在制备甘蔗病原菌治疗剂中的应用。所述的甘蔗内生真菌提取物能有效防治甘蔗黑穗病菌、甘蔗白条病菌或水稻稻瘟菌，具有良好的应用前景。

本发明的第一个目的是提供一种甘蔗内生真菌提取物，所述的甘蔗内生真菌提取物是从甘蔗内生真菌Fusarium proliferatum 15的发酵液中提取获得。

优选的，所述的甘蔗内生真菌提取物的制备步骤为：

(1)将甘蔗内生真菌Fusarium proliferatum 15进行发酵，收集其发酵液；

(2)发酵液用甲醇浸泡，减压浓缩，水相再用乙酸乙酯和正丁醇分别萃取，将萃取有机相减压浓缩得到总浸膏；

(3)将总浸膏用色谱柱分离，采用洗脱剂乙酸乙酯/石油醚按0～15:15～0体积比进行梯度洗脱，合并乙酸乙酯/石油醚按30:70、40:60、50:50、60:40、70:30体积比洗脱得到的组分,再用葡聚糖凝胶Sephadex LH-20色谱柱以MeOH/CH₂Cl₂按1:1体积比进行洗脱，除去色素，收集洗脱液，经浓缩干燥，即得到甘蔗内生真菌提取物。

本发明的第二个目的是提供所述的甘蔗内生真菌提取物在制备甘蔗病原菌或水稻稻瘟菌的生物防治剂中的应用。

优选的，所述的甘蔗病原菌为甘蔗黑穗病菌或甘蔗白条病菌。

优选的，所述的甘蔗内生真菌提取物用于防治甘蔗病原菌或水稻稻瘟菌的浓度为1mg/mL。

本发明的第三个目的是提供一种生物防治剂，其包含有效量的作为活性成分的甘蔗内生真菌提取物。