[发明专利]一株myc扩增的人骨肉瘤细胞系及其应用

说明书

本发明公开了一株myc扩增的人骨肉瘤细胞系及其应用。该人骨肉瘤细胞系的保藏编号为CCTCC NO:C2021308，其供体来源为临床人骨肉瘤患者，具有MYC扩增特性，具有胫骨原位成瘤能力且成瘤能力稳定，并且具有骨肉瘤肺转移能力，可被慢病毒转染，具有基因修饰功能。所述人骨肉瘤细胞系可应用于筛选和开发治疗骨肉瘤的药物、构建耐药的骨肉瘤模型、构建骨肉瘤动物模型、筛选骨肉瘤相关生物标志物和研究骨肉瘤发生发展机制。本发明为研究者深入开展人骨肉瘤瘤发生发展机制及寻找或评价治疗方案提供了实验素材。

技术领域

本发明涉及生物技术领域，尤其涉及一株myc扩增的人骨肉瘤细胞系及其应用。

背景技术

骨肉瘤(osteosarcoma，OS)是一种原发性恶性骨肿瘤，好发于儿童和青少年，恶性程度高，转移率高，致残致死率高，其好发部位在生长迅速的胫骨近端、肱骨近端和股骨远端，严重危害青少年的身体健康和生命。随着新辅助化疗联合手术治疗的广泛应用，骨肉瘤患者术后五年生存率提高约为70％，但是骨肉瘤易出现远处肺转移，肺转移后患者的五年生存率仅为10％～20％，骨肉瘤易发生化疗耐药性，所以其药物治疗近二十年来发展缓慢。

骨肉瘤发生的病因和发病机制尚不完全清楚，具有复杂性和异质性。在骨肉瘤患者基因组数据中，基于DNA拷贝数变异CNV分析，发现如MYC、CDKN2A等在骨肉瘤中比较共性的肿瘤致癌基因。其中，在骨肉瘤患者中MYC扩增的发生率约为50％，与肿瘤患者的耐药和发生转移的临床现象关系密切。MYC癌蛋白的过表达被认为多种人类肿瘤包括骨肉瘤在内的预后不良的驱动因素，其中MYC扩增是该蛋白过表达的主要因素之一，并且MYC扩增导致肿瘤中多种信号通路的调控异常，从而驱动肿瘤恶性进展。

因此，明确具有MYC扩增特性的骨肉瘤细胞系，对骨肉瘤的临床鉴别、诊断以及治疗的选择以及随访具有重要意义，目前还没有MYC扩增的骨肉瘤细胞系。所以，从临床分离具有MYC扩增的骨肉瘤患者的肿瘤组织中分离培养骨肉瘤细胞系，对于骨肉瘤发生发展机制的研究具有重要价值。

中国专利文献CN112080473A公布了骨肉瘤肺部转移灶原代细胞株及其培养方法和应用，应用于骨肉瘤肺部转移机理研究、抗肿瘤药物研究。中国专利文献CN102154209A公布了一种人骨肉瘤细胞株及其应用，该细胞系具有临床骨肉瘤的生物学特性，可应用于原发耐药和远处转移的研究。中国专利文献CN 102051344A公布了一组人称骨肉瘤细胞系及小鼠体内抑制模型，为骨肉瘤临床和基础研究提供一种体外和体内的实验材料，其动物模型对骨肉瘤常用化疗药物敏感，可用于模拟临床患者骨肉瘤的转归。但是关于MYC扩增的骨肉瘤细胞系未见报道。

发明内容

本发明为解决现有技术中的上述问题，提供了一株myc扩增的人骨肉瘤细胞系及其应用。

本发明的第一方面是提供一株myc扩增的人骨肉瘤细胞系，其保藏编号为CCTCCNO:C2021308，分类命名为人骨肉瘤细胞系SGH-OS01，保藏日期为2022年01月12日，保藏单位为中国典型培养物保藏中心，保藏地址为中国武汉大学。

进一步地，上述人骨肉瘤细胞系具有MYC扩增特性。

本发明的第二方面是提供上述人骨肉瘤细胞系的用途，该用途选自：

a)筛选和开发治疗骨肉瘤的药物；

b)构建耐药的骨肉瘤细胞瘤模型；

c)构建骨肉瘤动物模型；

d)构建骨肉瘤肺转移动物模型

d)筛选骨肉瘤相关生物标志物；和

e)研究骨肉瘤发生发展机制。

本发明的第三方面是提供构建骨肉瘤动物模型的方法，包括将上述人骨肉瘤细胞系注射到胫骨髓腔内、皮下或尾静脉的步骤。

进一步地，上述动物为非人的哺乳动物。