[发明专利]一种HPLC测定噁拉戈利钠有关物质的检测方法

说明书

一种HPLC测定噁拉戈利钠有关物质的检测方法，它涉及化学检测领域，本发明要解决噁拉戈利钠原料中不能准确控制杂质的量的问题，本发明采用HPLC方法测定噁拉戈利钠。本发明提供的高效液相色谱条件，可有效分离噁拉戈利钠原料中工艺杂质及其降解杂质，确保了其相关杂质的准确定量，为噁拉戈利钠的安全性、质量可控性提供了保障。经过高效液相色谱法的分析及方法学验证，建立噁拉戈利钠有关物质的检测方法，以确保有关物质检测方法的准确性。

技术领域

本发明属于化学检测领域，具体涉及一种HPLC测定噁拉戈利钠有关物质的检测方法。

背景技术

噁拉戈利是一种促性腺激素释放激素(GnRH)拮抗剂，用于治疗子宫内膜异位相关的中度至重度疼痛的主要成分。噁拉戈利通过与内源性GnRH竞争垂体细胞上的受体，快速地抑制垂体性腺轴，阻断内源性LH和FSH，从而降低激素分泌，达到治疗子宫内膜异位症的目的。本品化学名为4-[[(1R)-2-[5-(2-氟-3-甲氧基苯基)-3-[[2-氟-6-(三氟甲基)苯基]甲基]-3,6-二氢-4-甲基-2,6-二氧代-1(2H)-嘧啶基]-1-苯乙基]氨基]丁酸钠，其分子量：653.57，属于低分子化合物，可以采用高效液相方法对其有关物质进行质量控制。

杂质如下：

目前，该品种未收录于各国药典，专利WO202023459中公开的有关物质检测方法检测，其工艺杂质及其相关降解杂质无法有效分离，进而无法对其相关杂质定量控制。CN112763598B专利采用以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂的色谱柱，以磷酸盐缓冲液和乙腈为A流动相，乙腈和甲醇混合液为B流动相，进行梯度洗脱，进入检测器进行检测噁拉戈利钠关键中间体及其相关杂质。该专利的方法存在已知杂质与降解杂质分离效果差，各物质出峰时间较为集中，不能准确控制杂质的量。

发明内容

本发明的目的是为了解决噁拉戈利钠原料中不能准确控制杂质的量的问题，而提供一种HPLC测定噁拉戈利钠有关物质的检测方法。

本发明的一种HPLC测定噁拉戈利钠有关物质的检测方法，它是按照以下步骤进行的：

一、供试品溶液制备：取噁拉戈利钠供试品，精密称定，加稀释剂溶解并定容，摇匀，制成浓度为0.8～1.2mg/mL的噁拉戈利钠溶液；

二、对照品溶液制备：

精密量取步骤一的供试品溶液，按照供试品溶液与稀释剂体积比为1:10的比例加入稀释剂定容，摇匀，得定容后供试品溶液；取定容后供试品溶液与稀释剂按照体积比为1:100的比例加入稀释剂定容，摇匀，得对照溶液；

三、高效液相色谱分析

色谱柱：Agilent XDB C8，150×4.6mm，3.5μm，以浓度为0.02～0.05mol/L醋酸铵溶液-甲醇溶液作为流动相A，以浓度为0.02～0.05mol/L醋酸铵-乙腈-甲醇-四氢呋喃溶液作为流动相B，采用如下方式进行梯度洗脱：

从0～40min，流动相B的体积百分含量为40％～46％，流动相A的体积百分含量为60％～44％；从40～80min，流动相B的体积百分含量为46％～100％，流动相A的体积百分含量为44％～0％；从80.1～85min，流动相B的体积百分含量为40％，流动相A的体积百分含量为60％；

流速为1.0mL/min，柱温为35℃，检测波长为270nm，进样量为15μL。

进一步地，所述有关物质为杂质A、杂质B、杂质C、杂质D和降解杂质。