[发明专利]一种皮落青霉次级代谢产物在抗菌化合物中的应用及其提取纯化方法

权利要求书

1.一种皮落青霉次级代谢产物在抗菌化合物中的应用，其特征在于：所述皮落青霉次级代谢产物的化学结构式如式I所示：

2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于：所述皮落青霉次级代谢产物能够抑制耐甲氧西林表皮葡萄球菌、耐甲氧西林金黄色葡萄球菌活性。

3.根据权利要求1或2所述的应用，其特征在于：所述抗菌化合物包括抗菌药物及其盐。

4.权利要求1所述的皮落青霉次级代谢产物的提取纯化方法，其特征在于：由以下步骤组成：

S1、制备粗提物：将发酵培养得到的皮落青霉加入乙醇浸泡，抽滤得到滤液，将得到的滤液旋转蒸发到原体积的1/4，按照体积比1∶1加入乙酸乙酯萃取，然后再次旋转蒸发得到发酵浸膏，加入甲醇溶解发酵浸膏，得到粗提物；

S2、分离纯化：将所述粗提物用硅胶G层析柱分离，采用100-200目的硅胶G，洗脱梯度依次为：二氯甲烷；二氯甲烷∶甲醇＝80∶1；二氯甲烷∶甲醇＝60∶1；二氯甲烷∶甲醇＝40∶1；二氯甲烷∶甲醇＝20∶1；、二氯甲烷∶甲醇＝10∶1；收集并合并二氯甲烷∶甲醇＝20∶1和二氯甲烷∶甲醇＝10∶1的洗脱梯度所得的洗脱产物进行ODS柱层析纯化，洗脱梯度依次为：水；水∶甲醇＝80∶20；水∶甲醇＝60∶40；水∶甲醇＝40∶60；水∶甲醇＝20∶80；甲醇，将水∶甲醇＝20∶80的洗脱梯度所得的洗脱产物进行高效液相层析纯化，流动相为：甲醇∶水＝1∶1，流速2ml/min，得到淡紫色结晶。

5.根据权利要求4所述的皮落青霉次级代谢产物的提取纯化方法，其特征在于：所述皮落青霉菌种，为皮落青霉S14菌种。

6.根据权利要求4或5所述的皮落青霉次级代谢产物的提取纯化方法，其特征在于：所述发酵培养，是将皮落青霉S14菌种的种子培养液接种到大米固体发酵培养基中，在黑暗环境下置于培养箱中培养三十天，培养温度为28摄氏度。

7.根据权利要求6述的皮落青霉次级代谢产物的提取纯化方法，其特征在于：所述皮落青霉S14菌种的种子培养液，其制备方法是：将皮落青霉S14菌种接种在PDA培养基平板上，在黑暗环境下置于培养箱中培养3天，培养温度为28摄氏度，当PDA培养基平板上出现单菌落后，将孢子和菌丝刮至200毫升的PDB液体培养基中，在黑暗环境下置于培养箱中培养三天，培养温度为28摄氏度。

8.根据权利要求4或5所述的皮落青霉次级代谢产物的提取纯化方法，其特征在于：所述大米固体发酵培养基的制备方法：将1千克大米加入到1升蒸馏水中，加入0.075克硫酸镁和33克海水晶，混合均匀，调节pH值为7.0，121摄氏度下高压灭菌。