[发明专利]党参中过氧白术内酯Ⅲ的提取分离方法及其应用

权利要求书

1.党参中过氧白术内酯Ⅲ的提取分离方法，其特征在于，包括以下步骤：

1)取党参烘干打粉，用乙醇浸渍，采用加热回流提取法提取2～4次，每次提取2～3h，合并提取液减压浓缩，得到党参乙醇总浸膏；

2)将乙醇总浸膏分散于水中，用等体积的石油醚萃取3次，取上层萃取物减压浓缩得到石油醚相浸膏；

3)取石油醚相浸膏用石油醚溶解，与硅胶拌样，待溶剂挥发后作为上柱样品，上低压硅胶色谱柱，分别用石油醚、石油醚：乙酸乙酯＝1:1、乙酸乙酯、甲醇依次洗脱，分别减压浓缩回收溶剂得到浸膏，合并石油醚：乙酸乙酯＝1:1与乙酸乙酯的洗脱浸膏；

4)取石油醚：乙酸乙酯＝1:1与乙酸乙酯的洗脱浸膏，用石油醚：乙酸乙酯＝1:2混合溶剂全部溶解，与硅胶拌样，待溶剂挥发后作为上柱样品，上中压色谱柱，分别用石油醚、乙酸乙酯、甲醇进行梯度洗脱，V(PE):V(EA)＝1:0、20:1、10:1、5:1、3:1、1:1，V(EA):V(CH₃OH)＝1:0、1:1，将乙酸乙酯:甲醇＝1:1洗脱液通过分析型HPLC分析，根据峰型分为多个组分进行样品回收，分别减压浓缩，取有晶体析出的部分备用；

5)取步骤4)析出的晶体用甲醇溶解，称取MCI凝胶拌样，挥干溶剂甲醇后立即装MCI凝胶柱，再用制备型HPLC分离纯化，使用甲醇-水进行梯度洗脱，V(MeOH):V(H₂O)＝8:92→20:80→50:50→80:20→100:0，取V(MeOH):V(H₂O)＝20:80部分减压浓缩回收溶剂，剩余部分溶解于甲醇中，经半制备HPLC分离纯化，使用甲醇-水进行等度洗脱，V(MeOH):V(H₂O)＝80:20部分为过氧白术内酯Ⅲ。

2.根据权利要求1所述的党参中过氧白术内酯Ⅲ的提取分离方法，其特征在于：步骤1)的乙醇浓度为95％，浸渍12h，采用加热回流提取法提取4次，每次提取3h。

3.根据权利要求2所述的党参中过氧白术内酯Ⅲ的提取分离方法，其特征在于：步骤1)，用95％乙醇浸渍，采用加热回流提取法提取3次，每次提取2h。

4.根据权利要求2所述的党参中过氧白术内酯Ⅲ的提取分离方法，其特征在于：低压硅胶色谱柱的色谱条件为90mm×600mm；中压色谱柱的色谱条件为70mm×460mm；制备型HPLC的色谱条件为12nm×10μm。

5.根据权利要求1～4任一所述的方法得到的过氧白术内酯Ⅲ在制备促进脂肪分解制剂中的用途。

6.根据权利要求1～4任一所述的方法得到的过氧白术内酯Ⅲ在制备治疗肥胖的试剂或药物中的用途。