[发明专利]一种通过胚抢救技术获得樱花远缘杂交后代的方法

说明书

本发明提供一种通过胚抢救技术获得樱花远缘杂交后代的方法，属于种植技术领域，包括花粉获取，去雄，杂交，获取杂交胚，杂交胚培养获得杂交苗，炼苗移栽驯化。本发明优点：花粉活力高：花粉检测活力达92％；获得杂交后代多：比较杂交后采收种子育苗，本发明可以获得更多杂交后代，提高杂交的成功率，种子育苗的杂交成功率不足25％，本方法成功率达90％；缩短育苗周期：本方法可以避免种子播种育苗周期长的缺点，将育苗周期缩短至90天，杂交当年即可获得大量杂交后代种苗，加快了远缘杂交育种的时间；可以获得壮苗，提高幼苗成活率：胚抢救过程中可以对幼苗进行壮苗处理，增加幼苗的成活率，避免了杂交种子播种时容易产生弱苗难以成活的缺点。

技术领域

本申请涉及植物种植技术领域，尤其涉及一种通过胚抢救技术获得樱花远缘杂交后代的方法。

背景技术

樱属Cerasus植物隶属蔷薇科Rosaceae李亚科Prunusoidea，全球约150种，分布于欧亚大陆至北美洲的北半球温带，大多数樱花既有桃之艳丽，又有梅之芳香，是著名的春季木本观花植物和秋色叶树种。我国野生樱花资源丰富，现有野生樱花资源超过52种或变种，占世界樱属植物资源的1/3以上，其中有很多观赏价值非常高的樱花种类，但我国樱花育种工作还处于比较初级的阶段，这些樱花种质资源大多还处于待利用和待开发状态，因此利用这些樱花资源杂交育种培育新品种是一件非常有必要的工作。

樱花远缘杂交育种是对于樱花育种工作有着重要的意义，尤其是对于中国原生樱花的开发工作意义深远。樱花远缘杂交也存在亲和性低，容易败育的问题，胚抢救技术是解决此类问题的一项重要技术，是克服远缘杂交不亲和和败育问题的重要技术手段。

专利公开号为CN110050690A，专利名称为南方地区甜樱桃与中国樱桃种间杂交胚挽救成苗方法的专利，包括以下步骤：

1)收集花粉及授粉：以中国樱桃(Prunus.pseudocerasus L.)为父本，采集铃铛花期的自然花；在室内剥下花药，20-30℃干燥的条件下阴干；待花药开裂散粉后，采集于小玻璃瓶中并密封置于1-6℃的冰箱中保存备用；以欧洲甜樱桃(Prunus.avium L.)为母本，母本自交不亲和，铃铛期花朵进行人工不去雄授粉；授粉后立即套硫酸纸袋并5-10d后换网袋；

2)采果及低温层积处理：分别采摘母本处于硬核期胚长/种长PF0.5的杂交幼果，鲜果放入透明塑料保鲜盒，置1-6℃低温冰箱内贮存30-40d；

3)幼胚接种及萌发培养：低温处理结束后，冲洗干净果实，剥去果肉取胚；在超净工作台中进行消毒；剥去内种皮接种于含有第一外源生长促进添加剂的1/2MS固体培养基上，置于培养室培养；

4)继代扩繁培养：取萌发的幼胚无菌新梢，截取1.5-2.5cm长的茎段接种于继代培养基MS上，继代培养基MS加入第二外源生长促进添加剂；置于培养室培养35-45d；

5)生根培养：杂种苗继代培养后，将株高2cm以上生长健壮的丛生芽新梢接种于附加第三外源生长促进添加剂生根培养基1/2MS中；置于培养室培养35-45d，得到杂种幼苗；

6)炼苗移栽：将杂种苗炼苗10-20d，移栽入营养钵；移栽时间为2月中旬。

上述的专利存在以下的缺点：和其他樱花品种通用性不足，甜樱桃和樱花物种差异较大，胚抢救所采用的方法和材料有较大差异，操作复杂，成活率低。

发明内容

为了实现上述目的，本发明提供了一种通过胚抢救技术获得樱花远缘杂交后代的方法。本发明的目的即在克服樱花远缘杂交不亲和的障碍，提供一种获得的樱花远缘杂交后代繁殖方法。解决樱花远缘杂交不亲和，杂交胚胎成活率低的问题。

本发明采用了如下技术方案：一种通过胚抢救技术获得樱花远缘杂交后代的方法，包括以下步骤：