[发明专利]一种纯化融合蛋白的方法

权利要求书

1.一种纯化融合蛋白的方法，其特征在于，包括以下步骤：

步骤1，处理层析填料，上样；

步骤2，使用平衡缓冲液淋洗；

步骤3，使用洗脱缓冲液洗脱产品，并收集产品；

所述融合蛋白包括第一重链、第二重链、第一轻链和第二轻链，所述第一重链的一部分和第一轻链的一部分、所述第二重链的一部分和第二轻链的一部分分别配对，且二者之一或全部形成PD-1抗原结合位点，所述第一重链还包含细胞因子IL-15片段以及免疫球蛋白Fc部分，所述第二重链还包含IL-15受体片段以及免疫球蛋白Fc部分，所述第一重链中的细胞因子IL-15片段与第二重链中的IL-15受体片段相互结合。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述洗脱缓冲液包含NaAc-HAc、Tris-盐酸、柠檬酸缓冲液或磷酸缓冲液中的一种或几种。

3.根据权利要求2所述的方法，其特征在于，所述洗脱缓冲液还包含添加剂。

4.根据权利要求3所述的方法，其特征在于，所述添加剂选自氨基酸、醇、糖、盐中的一种或多种。

5.根据权利要求4所述的方法，其特征在于，所述氨基酸为精氨酸、甘氨酸、组氨酸、脯氨酸、苯丙氨酸和酪氨酸中的一种或几种。

6.根据权利要求4所述的方法，其特征在于，所述盐选自NaCl和CaCl₂的一种或两种。

7.根据权利要求4-6任一项所述的方法，其特征在于，所述添加剂的浓度为10-200mM，优选为20-100mM，更优选为30-80mM。

8.根据权利要求1-7任一项所述的方法，其特征在于，所述洗脱方法为等度洗脱法或线性洗脱法。

9.根据权利要求1-7任一项所述的方法，其特征在于，所述洗脱方法为等度洗脱法。

10.根据权利要求9所述的方法，其特征在于，所述洗脱缓冲液包含洗脱缓冲液1和洗脱缓冲液2。