[发明专利]一株嗜酸乳杆菌LS001及其培养方法与抑制幽门螺杆菌的应用在审
| 申请号: | 202211282768.3 | 申请日: | 2022-10-19 |
| 公开(公告)号: | CN115975858A | 公开(公告)日: | 2023-04-18 |
| 发明(设计)人: | 李云旭;李华文;马乐辉;刘瑞峰;韩清波 | 申请(专利权)人: | 天津小薇生物科技有限公司 |
| 主分类号: | C12N1/20 | 分类号: | C12N1/20;A61K35/747;A61P31/04;A23L33/135;C12R1/23 |
| 代理公司: | 北京科创易佰知识产权代理事务所(普通合伙) 16113 | 代理人: | 刘雪娇 |
| 地址: | 300000*** | 国省代码: | 天津;12 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 一株嗜 酸乳 杆菌 ls001 及其 培养 方法 抑制 幽门 螺杆 应用 | ||
1.一株嗜酸乳杆菌LS001,其特征在于,所述嗜酸乳杆菌(lactobacillusacidophilus)LS001,其在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心的保藏编号为CGMCCNo.23649,保藏日期为2021年10月22日,保藏机构地址:北京市朝阳区北辰西路1号院3号。
2.一种如权利要求1所述的嗜酸乳杆菌LS001的高密度培养方法,其特征在于,具体步骤如下:
(1)发酵菌种的活化
将嗜酸乳杆菌LS001斜面保藏菌种接种至已灭菌的10-20ml10%的脱脂乳摇瓶中进行活化,然后按照体积比1%-5%的接种量接种于已灭菌的MRS液体培养基中,以适应菌株在培养基中的生长,活化好的菌株放于4℃冰箱中,备用;
(2)种子培养
按照体积比1%-10%的接种量将步骤(1)活化好的菌种接种于已灭菌的MRS液体培养基中,37℃静置培养12-36h;
(3)发酵培养
将步骤(2)培养好的种子液按照1%-10%的接种量转接至已灭菌的改良肉汤培养基中,于30-37℃,50-200rpm,0.01-0.02Mpa培养12-36h,培养过程中流加60%-70%葡萄糖溶液,通过流加氨水控制发酵液pH值为5.5-6.0,得到高密度的嗜酸乳杆菌LS001发酵液。
3.如权利要求2所述的高密度培养方法,其特征在于,所述步骤(3)中改良肉汤培养基包括以下组分:酵母粉1-10g/L,酵母蛋白胨1-10g/L,葡萄糖5-15g/L,KH2PO41-3g/L,MgSO4·7H2O1-2/L,番茄浸出粉1-5g/L,吐温80 0.5-1.0g/L,硫酸亚铁0.05-0.15g/L,硫酸锰0.05-0.15g/L,生物素0.01-0.1g/L,VB120.01-0.5g/L,烟酰胺0.01-0.5g/L,盐酸硫铵0.01-0.1g/L,pH=5.5-6.0。
4.如权利要求2所述的高密度培养方法,其特征在于,所述步骤(3)中培养方法为:按照通气量1:0.01通入无菌空气,保持罐压0.01-0.02Mpa。
5.一种包含如权利要求1所述的嗜酸乳杆菌LS001的发酵制品。
6.一种如权利要求5所述的发酵制品的制备方法,其特征在于,制备步骤如下:
(1)收集菌体
将高密度的嗜酸乳杆菌LS001发酵液通过微滤膜进行过滤处理,当浓缩1-5倍时,加入等体积的纯化水,再进行过滤浓缩;直至滤出液的电导率≤2s/m,浓缩1-5倍后收集菌体;
(2)配料
根据步骤(1)浓缩液中嗜酸乳杆菌LS001的菌体数量,添加等量的其他类型的益生菌和干燥保护剂,搅拌均匀,使物料维持10-15℃;
(3)干燥
将复配液均匀的平铺在真空低温连续带式干燥机的干燥带上,控制温度25℃-30℃进行真空干燥;
(4)粉碎、包装
收集干燥后的物料,用粉碎机进行粉碎,粉碎过程控制温度≤30℃;按照产品类型进行无菌包装。
7.如权利要求6所述的制备方法,其特征在于,所述步骤(2)中的益生菌为鼠李糖乳杆菌GS014;所述鼠李糖乳杆菌(lactobacillusrhamnosus)GS014,其在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心的保藏编号为CGMCCNo.23646,保藏日期为2021年10月22日,保藏机构地址:北京市朝阳区北辰西路1号院3号。
8.如权利要求6所述的制备方法,其特征在于,所述步骤(2)中,干燥保护剂为:10%-15%低聚半乳糖、10%-15%低聚果糖、5%-10%脱脂乳粉、5%-10%异麦芽糊精、0.5%-1%硅酸钙。
9.一种如权利要求1所述的嗜酸乳杆菌LS001在制备抑制幽门螺杆菌产品中的应用。
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