[发明专利]用于选择性制造抗体-药物缀合物的方法

权利要求书

1.用于产生抗体-药物缀合物组合物的方法，其包括：

(i) 使抗体与还原剂在缓冲液中反应以还原链间二硫化物的步骤；和

(ii) 使药物接头中间体与步骤(i)中获得的具有硫醇基的抗体反应的步骤，其中

步骤(i)中的反应温度为-10℃至10℃，且

产生的抗体-药物缀合物组合物中的结合药物的平均数目是3.5至4.5，并且在产生的抗体-药物缀合物组合物中，其中4个药物接头与重-轻链间硫醇结合的抗体-药物缀合物的含量是50％或更多。

2.根据权利要求1所述的生产方法，其中产生的抗体-药物缀合物组合物中的结合药物的平均数目为4.0至4.1。

3.根据权利要求1或2所述的生产方法，其中步骤(i)中的反应温度为-5℃至5℃。

4.根据权利要求3所述的生产方法，其中步骤(i)中的反应温度为-3℃至3℃。

5.根据权利要求4所述的生产方法，其中步骤(i)中的反应温度为0℃至2℃。

6.根据权利要求5所述的生产方法，其中步骤(i)中的反应温度为0℃至1℃。

7.根据权利要求1至6中任一项所述的生产方法，其中所述还原剂以每个抗体分子2至3摩尔当量的量使用。

8.根据权利要求1至7中任一项所述的生产方法，其中所述还原剂为三(2-羧乙基)膦或其盐。

9.根据权利要求8所述的生产方法，其中三(2-羧乙基)膦的盐为三(2-羧乙基)膦盐酸盐。

10.根据权利要求1至9中任一项所述的生产方法，其中所述缓冲液为组氨酸缓冲液。

11.根据权利要求1至10中任一项所述的生产方法，其中所述缓冲液包含螯合剂。

12.根据权利要求11所述的生产方法，其中所述螯合剂为乙二胺四乙酸。

13.根据权利要求1至12中任一项所述的生产方法，其中所述抗体为抗TROP2抗体、抗CD98抗体、抗B7-H3抗体或抗HER2抗体。

14.根据权利要求1至13中任一项所述的生产方法，其中所述药物接头中间体具有N-取代的马来酰亚胺基。

15.根据权利要求14所述的生产方法，其中

所述药物接头中间体为

[式1]

[式2]

，或

[式3]

其中-GGFG-代表由甘氨酸-甘氨酸-苯丙氨酸-甘氨酸组成的四肽残基。

16.通过根据权利要求1至15中任一项所述的生产方法产生的抗体-药物缀合物组合物。

17.抗体-药物缀合物组合物，其中，其中结合药物的平均数目是3.5至4.5且其中4个药物接头与重-轻链间硫醇结合的抗体-药物缀合物的含量是50％或更多。

18.根据权利要求17所述的抗体-药物缀合物组合物，其中结合药物的平均数目为4.0至4.1。

19.根据权利要求17或18所述的抗体-药物缀合物组合物，其中所述抗体为抗TROP2抗体、抗CD98抗体、抗B7-H3抗体或抗HER2抗体。