[发明专利]一种重组抗菌肽PMAP-37及其制备方法和应用在审
| 申请号： | 202211236277.5 | 申请日： | 2022-10-10 |
| 公开（公告）号： | CN115947815A | 公开（公告）日： | 2023-04-11 |
| 发明（设计）人： | 董春明;许丽君;张瑞;赵国忠 | 申请（专利权）人： | 天津科技大学 |
| 主分类号： | C07K14/47 | 分类号： | C07K14/47;C12N15/12;C12N15/81;A61K38/17;A61P31/04;A01N37/46;A01P1/00 |
| 代理公司： | 南京禹为知识产权代理事务所(特殊普通合伙) 32272 | 代理人： | 刘峰 |
| 地址： | 300457 天津市滨*** | 国省代码： | 天津;12 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 重组 抗菌 pmap 37 及其 制备 方法 应用 | ||
1.一种重组抗菌肽PMAP-37，其特征在于：所述重组抗菌肽氨基酸序列如SEQ ID NO:1所示。
2.如权利要求1所述重组抗菌肽PMAP-37，其特征在于：所述重组抗菌肽碱基序列如SEQID NO:2所示。
3.权利要求1或2所述重组抗菌肽PMAP-37的制备方法，其特征在于：包括，通过酵母菌高效表达获得所述重组抗菌肽PMAP-37。
4.如权利要求3所述的制备方法，其特征在于：包括，
表达载体重组：
将SEQ ID NO:2所示PMAP-37目的基因进行合成，并连接于pPICZα-A载体上构成重组质粒pPICZα-PMAP-37-A；
重组菌株构建：
用SacI内切酶线性化重组后的质粒pPICZα-PMAP-37-A，并将处理后的质粒转入毕赤酵母GS115中，获得带有目的基因的重组菌株；
表达抗菌肽：
筛选出pPICZα-PMAP-37-A的阳性转化子进行诱导表达，收取发酵后的上清液，获得高浓度抗菌肽。
5.如权利要求4所述的制备方法，其特征在于：所述PMAP-37目的基因片段是将PMAP-37抗菌肽原始序列根据酵母表达系统偏好性进行密码子优化，在N端依次加入EcoRI，起始密码子ATG，6个组氨酸标签，以及GAT GAT GAT GATAAG15个碱基，C端依次加入终止密码子TAA及XbaI获得。
6.如权利要求4所述的制备方法，其特征在于：所述诱导表达，包括，经1.5％的甲醇诱导，最佳表达时间为5d。
7.权利要求1或2所述重组抗菌肽PMAP-37在制备抗菌剂中的应用，其特征在于：所述重组抗菌肽PMAP-37对金黄色葡萄球菌、大肠埃希、大肠O157、沙门氏菌和单增李斯特菌最小抑菌浓度为0.24μg/mL，对枯草芽孢杆菌最小抑菌浓度为0.12μg/mL。
8.权利要求1或2所述重组抗菌肽PMAP-37在制备红李抗菌剂中的应用。
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