[发明专利]一种手性固定相法拆分安妥沙星对映体的方法

说明书

本发明属于药物化学技术领域，具体涉及一种手性固定相法拆分安妥沙星对映体的方法，该方法先配制左旋安妥沙星和右旋安妥沙星的混合对照品溶液，采用HPLC法，以手性柱为色谱柱，以硫酸铜溶液‑异丙醇为流动相进行分析检测，所述流动相中硫酸铜溶液和异丙醇的体积比为87‑93:7‑13。本发明通过优化HPLC色谱条件，采用手性色谱柱实现了左旋安妥沙星、右旋安妥沙星的拆分，该方法分离效果好，干扰小，速度快，检测结果重复性好、精密度高、检出限低，还能对右旋体的含量进行测定，从而对盐酸安妥沙星片中右旋体进行严格控制。

技术领域

本发明属于药物化学技术领域，具体涉及一种手性固定相法拆分安妥沙星对映体的方法。

背景技术

左旋安妥沙星和右旋安妥沙星为对映异构体，其中左旋安妥沙星是药品盐酸安妥沙星的活性成分。而药品盐酸安妥沙星是我国拥有自主开发的一类新药，属于喹诺酮类药物，经结构改造后的安妥沙星抗菌作用不但优于氧氟沙星、环丙沙星，且氨基的引入能使安妥沙星有效降低光敏毒性，心脏毒性甚至低于莫西沙星，有较高的安全性。

药品盐酸安妥沙星中含单一左旋体，为了控制药品质量，有必要对盐酸安妥沙星片中右旋安妥沙星进行控制，但控制的前提是要将左旋安妥沙星和右旋安妥沙星拆分开。目前关于左旋安妥沙星、右旋安妥沙星测定的报道较少，如现有技术（洪建文，胡昌勤；左旋盐酸安妥沙星中对映体杂质的高效毛细管电泳法检测[J].分析测试学报，2007年第006期：888-890）中采用高效毛细管电泳法虽然实现了左旋安妥沙星、右旋安妥沙星对映体的的拆分，但是左旋安妥沙星、右旋安妥沙星的峰未达到基线分离，检测精密度（RSD大于2%）和检出限均比较低。因此，急需一种简单、快速、精度高的拆分左旋安妥沙星和右旋安妥沙星的方法。

发明内容

本发明的目的是提供一种手性固定相法拆分安妥沙星对映体的方法，该方法溶液配制简单、操作方便、拆分速度快、精度高，检出限低，还可用于测定右旋安妥沙星的含量，适用于盐酸安妥沙星片中右旋体的控制。

发明人在研究本发明前，利用手性流动相添加剂法拆分了安妥沙星对映体，虽然该方法较现有技术有一定的优势，但是其手性流动相添加了较高浓度的手性氨基酸和硫酸铜，为满足分离效果需要用氢氧化钠调节pH至3.5，但该pH条件下流动相放置一段时间后容易产出沉淀，每次使用前需要重新过滤，同时，平衡时间较长，这些都容易对色谱柱造成损伤；此外，流动相中还包含较高比例有机相，不环保。而为了减少有机相的使用和色谱柱的损伤，同时减少配制流动相的繁琐操作，发明人通过使用手性固定相拆分方法代替手性流动相添加剂拆分方法，解决了上述问题。具体方案如下：

本发明提供一种手性固定相法拆分安妥沙星对映体的方法，先配制左旋安妥沙星和右旋安妥沙星的混合对照品溶液，采用HPLC法，以手性柱为色谱柱，以硫酸铜溶液-异丙醇为流动相进行分析检测；所述流动相中硫酸铜溶液和异丙醇的体积比为87-93:7-13。具体地，手性色谱柱选择飞诺美3126（D）-青霉胺手性色谱柱。

本技术方案中通过优化HPLC色谱条件，使用飞诺美3126（D）-青霉胺手性色谱柱实现了左旋安妥沙星和右旋安妥沙星的拆分。该手性色谱柱的固定相是反相填料通过疏水作用与手性选择配体D-青霉胺紧密结合而成，流动相中添加一定浓度的铜离子，样品分析时通过铜离子分别与手性选择配体D-青霉胺和待测物形成可逆的金属络合物，当这种金属络合物是非对映金属络合物且稳定性有差异时，稳定性差的被先洗脱出来，稳定性好的络合物被后洗脱出来从而实现分离对映体的目的。

进一步地，上述技术方案中，所述流动相中硫酸铜溶液和异丙醇的体积比为87-90:10-13；优选体积比为90:10。

进一步地，上述技术方案中，所述硫酸铜溶液的浓度为2.8mmol/L。

本技术方案中，使用硫酸铜溶液-异丙醇为流动相，制备简单，不需要调节流动相pH，且长期放置也不会析出沉淀，不会对色谱柱造成损伤。

进一步地，上述技术方案中，HPLC检测中，波长为301nm。