[发明专利]樱草素在制备肝纤维化治疗药物中的应用

说明书

本发明公开了樱草素在制备肝纤维化治疗药物中的应用，所述樱草素化学名为2‑甲氧基‑6‑戊基‑1,4‑苯醌，分子式为Csubgt;12/subgt;Osubgt;3/subgt;Hsubgt;16/subgt;。细胞实验结果显示，樱草素降低肝星状细胞增殖活力，但未引起肝星状细胞乳酸脱氢酶释放增加，对肝细胞增殖活力无明显抑制作用；动物实验结果显示，樱草素降低四氯化碳致肝纤维化模型小鼠血清学指标水平，减少其肝组织中胶原纤维含量，抑制肝星状细胞活化标志物表达，显示出优良的抗肝纤维化作用，表明樱草素可用于制备有效的治疗肝纤维化药物。

技术领域

本发明属于生物医药技术领域，具体涉及樱草素在制备肝纤维化治疗药物中的应用。

背景技术

肝纤维化是由病毒、酒精、高脂饮食或药物等不同致病因子长期刺激引起的肝组织内持续病理性损伤-修复而形成的一种疾病，是多种慢性肝病发展为肝硬化和/或肝细胞癌的共同病理过程。目前肝纤维化已位居全球疾病致死率排行第十一位，严重危害人类的生命健康，寻求有效的肝纤维化治疗手段迫在眉睫。

肝纤维化的典型病理特征在于肝组织内细胞外基质成分异常沉积，引起肝脏内结构改变，肝功能紊乱。肝星状细胞是肝脏内细胞外基质生成的主要来源。正常肝脏中，肝星状细胞保持静息态，增殖活力较低，合成胶原等细胞外基质的能力较弱。当肝脏损伤时，肝星状细胞被激活，其表型从静息态转变成激活态，活化的肝星状细胞大量增殖并分泌细胞外基质参与肝纤维化的形成和肝内组织结构重塑。可见，肝星状细胞活化是肝纤维化发生发展的核心环节，抑制肝星状细胞活化成为挖掘肝纤维化潜在治疗策略的重要方向。

肝纤维化的基本治疗策略是病因治疗联合抗肝纤维化治疗，对于缺乏特异性病因治疗或不能进行特异性病因治疗的肝纤维化患者，应积极采取抗肝纤维化治疗措施。目前，临床上尚无明确的肝纤维化治疗化学或生物药物。秋水仙碱系百合科植物秋水仙中提取出来的单体化合物，较早运用于实验性肝纤维化治疗，但因毒副作用大等缺点限制了其临床应用。我国医药市场现有多种注册适应证为肝纤维化的中成药上市，但具有服用量大、服用周期长、治疗机理不明确等缺点。这使得安全有效的肝纤维化治疗药物研发迫在眉睫。

樱草素是从报春花科植物鄂报春(Primula obconica Hance)叶子和茎毛状体中提取出的天然苯醌类化合物，目前研究显示其具有抗菌和抗肿瘤活性，但对其抗肝纤维化活性无任何报道。

发明内容

本发明的目的是提供樱草素在制备肝纤维化治疗药物中的应用。

本发明先采用小鼠正常肝细胞株AML12和小鼠肝星状细胞株JS-1，研究不同浓度的樱草素(2、4、8μM)对肝细胞、肝星状细胞增殖活力的影响；采用小鼠肝星状细胞株JS-1，研究樱草素对肝星状细胞内乳酸脱氢酶释放的影响；采用小鼠肝星状细胞株JS-1，在转录与翻译水平上研究樱草素对肝星状细胞活化程度及胶原合成水平的影响；采用四氯化碳致小鼠肝纤维化模型，在动物水平上研究不同剂量樱草素(1.5、3、6mg/kg)对小鼠血清肝纤维化指标、肝组织羟脯氨酸含量、肝星状细胞活化程度及胶原合成水平、肝组织胶原含量情况的影响。

本发明首次发现樱草素具有预防或者治疗肝纤维化的作用。细胞实验结果显示，樱草素不影响小鼠肝细胞的增殖活力，但可显著降低小鼠肝星状细胞的增殖活力；樱草素不改变小鼠肝星状细胞的乳酸脱氢酶释放量，无明显的细胞毒性；樱草素对肝星状细胞活化标志物α-SMA和胶原基因COL1A1的转录和翻译水平均具有显著的抑制作用，且呈现浓度依赖性。动物实验结果显示，樱草素减少肝纤维化小鼠血清学诊断标志物层粘连蛋白、透明质酸、III型前胶原和IV型胶原的含量；樱草素降低肝纤维化小鼠肝脏中羟脯氨酸的含量，并减少α-SMA和COL1A1的mRNA和蛋白表达；樱草素显著减少肝纤维化小鼠肝脏中胶原含量。

本发明揭示了樱草素对肝纤维化的治疗作用及分子机制，为将其制备为治疗肝纤维化药物提供重要依据。

附图说明

图1为樱草素对小鼠正常肝细胞AML12增殖活力的影响。