[发明专利]芒果止咳片指纹图谱的建立及组分含量测定方法

权利要求书

1.一种芒果止咳片指纹图谱的建立方法，其特征在于，包括以下步骤：

S1.配制供试品溶液：去除芒果止咳片的薄膜包衣，研磨，称定研磨后的粉末0.4g，加入10mL水，振摇使粉末溶解，置于分液漏斗，加入乙酸乙酯45ml，振摇萃取10min，萃取2次，静置分层，合并2次乙酸乙酯萃取液，水浴挥干，残渣加甲醇溶解，移至5mL容量瓶，加甲醇定容，摇匀，13000r.min^-1离心10min，取上清液即为所述供试品溶液；

S2.高效液相色谱检测：对所述供试品溶液进行高效液相色谱检测，得到所述芒果止咳片指纹图谱；

色谱条件为：

色谱柱：Phenomenex Gemini C18柱；

以0.1％磷酸水溶液为流动相A，乙腈为流动相B，进行梯度洗脱；

洗脱流程为：0→10min，5→7％B；10→20min，7→11％B；20→25min，11→13％B；25→40min，13→16％B；40→50min，16→20％B；50→60min，20→25％B；60→70min，25→35％B；70→75min，35％B；

流速1.0mL/min；柱温30℃；进样量为5μL；

检测波长为：0→9min，272nm；9→34min，216nm；34→53min，258nm；53→75min，216nm。

2.一种芒果止咳片指纹图谱共有模式的建立方法，其特征在于，包括以下步骤：

S1.配制供试品溶液：去除芒果止咳片的薄膜包衣，研磨，称定研磨后的粉末0.4g，加入10mL水，振摇使粉末溶解，置于分液漏斗，加入乙酸乙酯45ml，振摇萃取10min，萃取2次，静置分层，合并2次乙酸乙酯萃取液，水浴挥干，残渣加甲醇溶解，移至5mL容量瓶，加甲醇定容，摇匀，13000r.min^-1离心10min，取上清液即为所述供试品溶液；

S2.取不同批次芒果止咳片，重复S1步骤得到不同批次供试品溶液；

S3.将不同批次供试品溶液进行高效液相色谱检测，得到不同批次芒果止咳片指纹图谱；

色谱条件为：

色谱柱：Phenomenex Gemini C18柱；

以0.1％磷酸水溶液为流动相A，乙腈为流动相B，进行梯度洗脱；

洗脱流程为：0→10min，5→7％B；10→20min，7→11％B；20→25min，11→13％B；25→40min，13→16％B；40→50min，16→20％B；50→60min，20→25％B；60→70min，25→35％B；70→75min，35％B；

流速1.0mL/min；柱温30℃；进样量为5μL；

检测波长为：0→9min，272nm；9→34min，216nm；34→53min，258nm；53→75min，216nm。

S4.将得到的不同批次的芒果止咳片指纹图谱数据导入《中药指纹图谱相似度评价软件》分析，采用中位数法，时间窗口0.10，进行多点校正，得到所述芒果止咳片指纹图谱共有模式。

3.一种芒果止咳片中组分含量的测定方法，其特征在于，包括以下步骤：

S1.制备混合对照品溶液：分别取没食子酸、原儿茶酸、马来酸氯苯那敏、芒果苷、高芒果苷、金丝桃苷、异槲皮苷对照品适量，精密称定，加体积分数为70％的甲醇水溶液溶解，制成含没食子酸、原儿茶酸、马来酸氯苯那敏、芒果苷、高芒果苷、金丝桃苷、异槲皮苷质量浓度分别为1830μg/mL、101.0μg/mL、431.4μg/mL、2613μg/mL、362.3μg/mL、155.4μg/mL、74.80μg/mL的混合对照品溶液；

S2.配制供试品溶液：去除芒果止咳片的糖衣，研磨，精密称定研磨后的粉末0.3g，精密加入体积分数为70％的甲醇水溶液25mL，超声40min，滤过，残渣精密加入体积分数为70％的甲醇水溶液25mL，超声40min，滤过，合并滤液，水浴挥干，残渣加体积分数为70％的甲醇水溶液溶解，定容至10mL容量瓶，摇匀，离心10min，取上清液即得所述制供试品溶液；

S3.绘制标准曲线：分别精密吸取S1制备的混合对照品溶液0.125mL、0.5mL、1.0mL、2.0mL、4.0mL分别置于5mL容量瓶中，体积分数为70％的甲醇水溶液稀释至刻度，摇匀即得7个系列浓度的混合对照品溶液，以5μL的进样量进行高相液相色谱分析，绘制得到没食子酸、原儿茶酸、马来酸氯苯那敏、芒果苷、高芒果苷、金丝桃苷和异槲皮苷的标准曲线；

S4.对配制的供试品溶液进行高效液相色谱分析，将得到的组分峰面积带入绘制的标准曲线中，得到组分含量；

步骤S3和S4中，高相液相色谱分析的色谱条件为：

色谱柱：Phenomenex Gemini C18柱；

以0.1％磷酸水溶液为流动相A，乙腈为流动相B，进行梯度洗脱；

洗脱流程为：0→10min，5→7％B；10→20min，7→11％B；20→25min，11→13％B；25→40min，13→16％B；40→50min，16→20％B；50→60min，20→25％B；60→70min，25→35％B；70→75min，35％B；

流速1.0mL/min；柱温30℃；进样量为5μL；

检测波长为258nm。